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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 【求助】使用Sepdex LH20分离海星皂苷的一些问题
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xinshi

银虫 (正式写手)

[交流] 【求助】使用Sepdex LH20分离海星皂苷的一些问题 已有8人参与

我想用Sepdex LH20分离纯化皂苷，2个问题请教一下各位前辈。
1.Sepdex LH20的具体使用方法以及注意事项?
2.洗脱溶剂体系是什么呢？洗脱过程中能换洗脱溶剂吗？
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1楼 2010-10-18 16:26:50
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ldq0501

木虫 (正式写手)
★ ★
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karl2100(金币+1):多谢指教！ 2010-11-10 00:16:57
LH-20蛮贵的，用时装柱子不要浪费，分这冲极性比较大的，可以先用甲醇泡LH20一些时间，然后填装入柱子，一般体系固定，洗脱溶剂也不要变，差不多就可以。
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小结+实验+总结
2楼2010-10-18 19:40:38
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xinshi

银虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by ldq0501 at 2010-10-18 19:40:38:
LH-20蛮贵的，用时装柱子不要浪费，分这冲极性比较大的，可以先用甲醇泡LH20一些时间，然后填装入柱子，一般体系固定，洗脱溶剂也不要变，差不多就可以。

也就是说只用甲醇洗脱就可以了？是嘛？
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3楼2010-10-18 19:50:40
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zenith1527

银虫 (小有名气)
★ ★
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karl2100(金币+1):谢谢发言！ 2010-11-10 00:17:18
不是，你要分离的东西极性比较大，应用两相或三相洗脱剂，采取反相洗脱，如水：甲醇（100%：0增加到0：100%），以5%或10%梯度增加甲醇的含量。
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振兴中华医药，从我做起！！！
4楼2010-10-18 20:10:16
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GWBST

金虫 (著名写手)
★
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样品一定要完全溶于甲醇
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事在人为
5楼2010-10-19 08:06:24
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renxueqin

金虫 (正式写手)
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引用回帖:
Originally posted by GWBST at 2010-10-19 08:06:24:
样品一定要完全溶于甲醇

如果不完全溶于甲醇，加点少量氯仿或其他也可以的吧
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6楼2010-10-19 12:14:00
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h_chen

铁杆木虫 (著名写手)
★
karl2100(金币+1):谢谢！ 2010-11-10 00:17:33
凝胶在不同的溶剂中膨胀系数不同，因此在实验室中有很多不同溶剂的凝胶柱，比如甲醇凝胶，氯仿甲醇凝胶  甲醇水凝胶，丙酮等，皂苷用氯仿甲醇（1:1）可以，甲醇也可以。凝胶柱很长恨细，不能干，样品一定要完全溶解。
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学生到企业人转变中
7楼2010-10-19 12:55:44
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zljmxllmf

新虫 (小有名气)
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karl2100(金币+1):多谢指教！ 2010-11-10 00:17:46
LH-20柱子使用时候没什么特别的注意事项，洗脱剂系统是甲醇-水或者纯甲醇，控制好流速不要走太快就行了，增大水含量流速会减慢。洗脱过程中不能换比例，也就是说你要么用纯甲醇走柱子，要么用一个比例的甲醇-水系统走柱子，走完了之后用纯甲醇冲两三个柱体积就可以再用了。样品必须是甲醇/水/甲醇-水能完全溶解的，也可以用氯仿溶解，但是用量要尽量少。
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8楼2010-11-07 19:27:09
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caolihua

铜虫 (初入文坛)
★
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凝胶的洗脱剂偶很 多，不局限于以上几种，也可以梯度洗脱。
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9楼2010-11-09 22:19:12
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