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【求助/交流】热不对称PCR的问题，回帖就送金币！！多谢帮忙回答的，帮顶的！！已有12人参与
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首先，热不对称PCR的好处是什么？它主要用来扩已知序列的旁侧基因，然后通过 一步步提高退火温度，最后达到P出一条带的目的。这样理解对吗？ 其次，我现在做启动子的染色体步移，加了接头后。试剂盒也是推荐用热不对称PCR。但这时我知道我的接头序列，又知道我的已知序列，完全可以用普通PCR扩嘛。这样想对吗？ 还有，不太理解接头引物AP和特异性引物GSP之间在片段长度和退火上的差异。试剂盒上的：AP1:22个碱基 51度退火 AP2:19， 57度 。而建议我的GSP：25~28个碱基， 退火和GC和AP差不多。为什么碱基数差那么多？ 最后，2步法PCR（94度,64度）和3步法（94，退火，72度）有什么区别？好处是？ 大家一起来讨论下这四个问题吧！！多谢了~~~谢谢！！！！ 回帖就有金币，每人可领5次！！ |
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