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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于 亚细胞定位
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wencul

铁杆木虫 (著名写手)

Metagross

[交流] 【求助/交流】关于 亚细胞定位

请教大家



我最近 做一个蛋白的亚细胞定位  用的是pEGFP-N1 载体



但是我的蛋白很小就9Kda  GFP很大 26KDa   老板说 GFP会干扰小蛋白  不准确

  

要我重新做



请问 各位     还有什么好的办法 能做亚细胞定位的？？？
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Metagross
1楼 2010-10-16 22:20:06
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taigongzaici

新虫 (小有名气)
门外汉，关注之
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2楼2010-10-17 09:01:55
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dfl204

铁杆木虫 (著名写手)
wencul(金币+1): 2010-10-22 21:05:35
蛋白小不是关键问题。有的情况下做定位都只有一段信号肽序列去和GFP融合。只要你多次定位的结果是可以重复的，结果就是可信的。

请问你用的是什么方法做的定位？
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3楼2010-10-17 09:34:37
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virus2009

金虫 (正式写手)

人称 龙哥
我也在做定位，觉得辅助碱基的选择对GFP的表达有很大影响，选择不好的话会影响GFP的折叠，进而影响GFP荧光的表达！
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virus
4楼2010-10-17 10:48:38
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
wencul(金币+1): 2010-10-22 21:05:49
免疫荧光咯~
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5楼2010-10-17 12:57:20
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天涯萧客

金虫 (正式写手)

放羊大叔
wencul(金币+1): 2010-10-22 21:05:21
你要先做N C段有没有信号肽，没有的话 用myc标签就可以啊
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100年后地球照样转
6楼2010-10-17 13:39:02
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