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apple6299

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by sn198651 at 2010-10-21 21:14:17:
2步法的FQ-PCR没做过
我现在都是用一步法的做

2步法的我们只用在常规RT-PCR中
是不是手提RNA不稳定的原因 测过浓度么

RNA是用TRIZOL法提的,跑了个电泳,质量还不错!用紫外分管光度计测了cDNA的浓度,在2000ng/ul左右,后来稀释了个十倍来进行Real-timePCR的
11楼2010-10-22 10:46:30
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apple6299

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by silicare at 2010-10-22 08:40:30:
CT值稍稍的有一点点的高

把你的重复情况发上来看看,复孔怎么样?

对,CT值是偏高了。后来每个样做了三个重复,也都在30-32之间,平行样的循环数之间相差也在1个循环左右,属于可信范围内的!扩增曲线仍然不太规则。不知道是样品问题还是机器问题。
12楼2010-10-22 10:52:59
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可帅儿

银虫 (正式写手)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
有没有可能是试剂的问题?和仪器不是很配套?
追随自己的心!不要做让自己后悔的事!
13楼2012-04-18 10:55:21
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