【求助/交流】为何定量PCR扩增曲线不规则 - 分子生物 - 综合其他

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铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:

Originally posted by sn198651 at 2010-10-21 21:14:17:
2步法的FQ-PCR没做过
我现在都是用一步法的做

2步法的我们只用在常规RT-PCR中
是不是手提RNA不稳定的原因测过浓度么

RNA是用TRIZOL法提的，跑了个电泳，质量还不错！用紫外分管光度计测了cDNA的浓度，在2000ng/ul左右，后来稀释了个十倍来进行Real-timePCR的

11楼2010-10-22 10:46:30

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:

Originally posted by silicare at 2010-10-22 08:40:30:
CT值稍稍的有一点点的高

把你的重复情况发上来看看，复孔怎么样？

对，CT值是偏高了。后来每个样做了三个重复，也都在30-32之间，平行样的循环数之间相差也在1个循环左右，属于可信范围内的！扩增曲线仍然不太规则。不知道是样品问题还是机器问题。

12楼2010-10-22 10:52:59

银虫 (正式写手)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

有没有可能是试剂的问题？和仪器不是很配套？

追随自己的心！不要做让自己后悔的事！

13楼2012-04-18 10:55:21

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