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wuweibewin

金虫 (正式写手)

[交流] southern杂交增加条带亮度的方法

southern杂交时条带亮度总是较弱,谁能提供一些参考方案？？
我们酶切DNA总量已经达到了150ug
真空印记转印 2h
固定         2h
预杂交       2.5h
杂交过夜    约14-16h
封阻        30min
酶联        30min
显色        16h

利用地高辛标记
使用含50%的甲酰胺的杂交液，杂交温度40度，实验材料烟草！
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wuwei_hello@163.com
1楼 2010-10-05 15:56:08
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magy2006

木虫 (著名写手)
wuweibewin(金币+4, 博学EPI+1):不过增加探针的量也不失是一种方法！ 2010-10-06 15:36:02
wuweibewin(金币+16): 2010-11-25 09:41:23
信号弱有可能是你的探针本身就很稀啊，探针浓度不够，信号肯定会弱的。
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3楼2010-10-06 14:45:33
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wuweibewin

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by magy2006 at 2010-10-06 14:45:33:
信号弱有可能是你的探针本身就很稀啊，探针浓度不够，信号肯定会弱的。

通过对标记探针的标记效率进行确定，探针标记效率完全达到了实验要求！！
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wuwei_hello@163.com
4楼2010-10-06 15:34:52
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wuweibewin

金虫 (正式写手)
小木虫上高手寥寥无几！大多数不过是混混罢了 ！
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wuwei_hello@163.com
5楼2010-10-10 14:56:26
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