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wuweibewin

金虫 (正式写手)

[交流] southern杂交增加条带亮度的方法

southern杂交时条带亮度总是较弱,谁能提供一些参考方案??
我们酶切DNA总量已经达到了150ug
真空印记转印 2h
固定         2h
预杂交       2.5h
杂交过夜    约14-16h
封阻        30min
酶联        30min
显色        16h

利用地高辛标记
使用含50%的甲酰胺的杂交液,杂交温度40度,实验材料烟草!

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wuwei_hello@163.com
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magy2006

木虫 (著名写手)

wuweibewin(金币+4, 博学EPI+1):不过增加探针的量也不失是一种方法! 2010-10-06 15:36:02
wuweibewin(金币+16): 2010-11-25 09:41:23
信号弱有可能是你的探针本身就很稀啊,探针浓度不够,信号肯定会弱的。
3楼2010-10-06 14:45:33
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wuweibewin

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by magy2006 at 2010-10-06 14:45:33:
信号弱有可能是你的探针本身就很稀啊,探针浓度不够,信号肯定会弱的。

通过对标记探针的标记效率进行确定,探针标记效率完全达到了实验要求!!
wuwei_hello@163.com
4楼2010-10-06 15:34:52
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wuweibewin

金虫 (正式写手)

小木虫上高手寥寥无几!大多数不过是混混罢了 !
wuwei_hello@163.com
5楼2010-10-10 14:56:26
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