应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】镍柱纯化，洗不下来啊。。。
52/1返回列表
查看: 3129  |  回复: 25
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

dy_414

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】镍柱纯化，洗不下来啊。。。 已有5人参与

本人纯化一株定点突变蛋白，在原有蛋白的His tag末尾加上一个半胱氨酸，经过变性镍柱纯化咪唑洗脱，>80%的蛋白都没有洗下来，其他的蛋白，包括突变前的都可以洗脱的非常好~请问诸位大侠有没有类似的经历或者解决办法啊~~
回复此楼

» 猜你喜欢
我坚信，rp是攒出来的
1楼 2010-10-04 20:58:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lzwangjf

铁虫 (小有名气)
★ ★
scelab(金币+2):热心虫友，欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-10-07 23:06:48
dy_414(金币+2): 2010-10-09 14:29:23
如果EDTA不影响你后续试验的话，建议可以用低浓度的EDTA去洗。。要么就是加大咪唑的浓度，检查你咪唑的浓度和质量。。。
赞一下(1人) 回复此楼
17楼2010-10-07 19:36:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 26 个回答

flllgend

金虫 (正式写手)
衷心祝福楼主，我为金币而来
赞一下 回复此楼
2楼2010-10-04 21:00:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lwiaanngg

铁杆木虫 (著名写手)
★
reasonspare(金币+1):谢谢分享。 2010-10-06 08:34:09
dy_414(金币+1): 2010-10-06 11:12:11
引用回帖:
Originally posted by dy_414 at 2010-10-04 20:58:14:
本人纯化一株定点突变蛋白，在原有蛋白的His tag末尾加上一个半胱氨酸，经过变性镍柱纯化咪唑洗脱，>80%的蛋白都没有洗下来，其他的蛋白，包括突变前的都可以洗脱的非常好~请问诸位大侠有没有类似的经历或者解 ...

你的imidozale 的浓度如何？增加看看
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2010-10-05 09:11:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kxxin66

金虫 (小有名气)
什么是“变性镍柱”？是指的包含体的变复性吗？如果是的话，可能沉淀在柱子上了或者就没挂柱子直接穿出了。
赞一下 回复此楼
4楼2010-10-05 09:31:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 26 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭