24小时热门版块排行榜    

查看: 2709  |  回复: 25
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

dy_414

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】镍柱纯化,洗不下来啊。。。 已有5人参与

本人纯化一株定点突变蛋白,在原有蛋白的His tag末尾加上一个半胱氨酸,经过变性镍柱纯化咪唑洗脱,>80%的蛋白都没有洗下来,其他的蛋白,包括突变前的都可以洗脱的非常好~请问诸位大侠有没有类似的经历或者解决办法啊~~
回复此楼
我坚信,rp是攒出来的
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lwiaanngg

铁杆木虫 (著名写手)


reasonspare(金币+1):谢谢分享。 2010-10-06 08:34:09
dy_414(金币+1): 2010-10-06 11:12:11
引用回帖:
Originally posted by dy_414 at 2010-10-04 20:58:14:
本人纯化一株定点突变蛋白,在原有蛋白的His tag末尾加上一个半胱氨酸,经过变性镍柱纯化咪唑洗脱,>80%的蛋白都没有洗下来,其他的蛋白,包括突变前的都可以洗脱的非常好~请问诸位大侠有没有类似的经历或者解 ...

你的imidozale 的浓度如何?增加看看
3楼2010-10-05 09:11:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 26 个回答

flllgend

金虫 (正式写手)

衷心祝福楼主,我为金币而来
2楼2010-10-04 21:00:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kxxin66

金虫 (小有名气)

什么是“变性镍柱”?是指的包含体的变复性吗?如果是的话,可能沉淀在柱子上了或者就没挂柱子直接穿出了。
4楼2010-10-05 09:31:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lliu

新虫 (小有名气)


reasonspare(金币+1):谢谢分享。 2010-10-06 08:34:17
用0.1-0.2M EDTA, 什么样的蛋白都能洗下来。之后用0.1M NiSO4 重新再生。
5楼2010-10-05 10:20:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 317求调剂 +3 申子申申 2026-03-19 6/300 2026-03-19 14:16 by 申子申申
[考研] 材料专硕306英一数二 +10 z1z2z3879 2026-03-16 13/650 2026-03-18 14:20 by 007_lilei
[考研] 280求调剂 +6 咕噜晓晓 2026-03-18 7/350 2026-03-18 11:25 by 无际的草原
[考研] 301求调剂 +9 yy要上岸呀 2026-03-17 9/450 2026-03-18 08:58 by 无际的草原
[考研] 293求调剂 +11 zjl的号 2026-03-16 16/800 2026-03-18 08:10 by zhukairuo
[硕博家园] 湖北工业大学 生命科学与健康学院-课题组招收2026级食品/生物方向硕士 +3 1喜春8 2026-03-17 5/250 2026-03-17 17:18 by ber川cool子
[考研] 308求调剂 +4 是Lupa啊 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:12 by ruiyingmiao
[考研] 一志愿南京大学,080500材料科学与工程,调剂 +4 Jy? 2026-03-16 4/200 2026-03-17 11:02 by gaoqiong
[考研] 考研调剂 +3 淇ya_~ 2026-03-17 5/250 2026-03-17 09:25 by Winj1e
[考研] 278求调剂 +3 Yy7400 2026-03-13 3/150 2026-03-17 08:24 by laoshidan
[考研] 一志愿,福州大学材料专硕339分求调剂 +3 木子momo青争 2026-03-15 3/150 2026-03-17 07:52 by laoshidan
[考研] 304求调剂 +5 素年祭语 2026-03-15 5/250 2026-03-16 17:00 by 我的船我的海
[考研] 一志愿211 0703方向310分求调剂 +3 努力奋斗112 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:44 by houyaoxu
[考研] 321求调剂 +5 大米饭! 2026-03-15 5/250 2026-03-16 16:33 by houyaoxu
[考研] 0703化学调剂 290分有科研经历,论文在投 +7 腻腻gk 2026-03-14 7/350 2026-03-16 10:12 by houyaoxu
[考研] 0856求调剂 +3 刘梦微 2026-03-15 3/150 2026-03-16 10:00 by houyaoxu
[考研] 288求调剂 +4 奇点0314 2026-03-14 4/200 2026-03-14 23:04 by JourneyLucky
[考研] 080500,材料学硕302分求调剂学校 +4 初识可乐 2026-03-14 5/250 2026-03-14 21:08 by peike
[考研] 266求调剂 +4 学员97LZgn 2026-03-13 4/200 2026-03-14 08:37 by zhukairuo
[考研] 311求调剂 +3 冬十三 2026-03-13 3/150 2026-03-13 20:41 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见