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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】不加碳源的无机盐培养基为什么会长很多菌？有培养基配方，小弟先谢谢了
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sophia_heart

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】不加碳源的无机盐培养基为什么会长很多菌？有培养基配方，小弟先谢谢了 已有15人参与

我分离出一种菌从一个平板转接到另一个平板都会长很多，平板是无机盐琼脂固体培养基，它的配方如下：
每升： Na2HPO4 ·2H2O   2.7 g;    KH2PO4   1.4 g;   (NH4)2SO4    0.5 g;    MgSO4 · 7H2O  0.2 g;和 10 ml微量元素溶液 固体培养基加入1.8%的琼脂（日本进口原装的）
微量元素溶液 :
每升 MnSO4 ·4H2O,   0.4 g;   ZnSO4·7H2O,    0.4 g;    Na2SO4,  10.0 g;         Na2MoO4· 2H2O,   0.1 g;    FeSO4 ·7H2O,  2.0 g;      CuSO4 · 5H2O,   0.1 g; CaCl2 1.0 g

我对比了两种不同公司的琼脂培养基了，但是每个公司的都长好多菌，从原理上讲在这个培养基当中只有琼脂是碳源了，还有就是空气中的二氧化碳，从文献上看一般利用琼脂的菌在生长过程中，会在菌落周围形成一圈被溶掉的坑或洞，但是在我的平板上琼脂看上去完好无损；再有我的菌在显微镜下观察用100*16的油镜观察只能看清大概轮廓，是杆状细菌。我还没查到在没有光照条件下可以利用二氧化碳的细菌
我的菌转接是划线方法转接的，灭菌采用115℃，30min，有时可能局部达到121℃，灭菌锅不太好使。培养条件是避光，30℃。
请问各位牛人能给我分析一下吗？有什么建议小弟不胜感激，谢谢了。
细菌图片不太清楚
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1楼 2010-09-26 19:27:31
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苓苓happy

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
刚开始做微生物，学习了很多
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8楼2011-12-08 22:17:10
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feiye2214

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
有以下几种可能：
1.灭菌温度可能较低，我用的LB琼脂都是121度15min，在SOC等的灭菌才116度30min；
2.转接的时候，染菌了，你的超净工作台处理的很干净么？等因素；
3.有没有可能是你要划线的菌是真菌，孢子很多，蹦的到处都是，才会在转接板上长很多？
4.要是你只在划线的地方看见菌落的话，应该没问题的吧，就是你划的菌量多，要是在划线范围以外的发现很多菌落，那就是以上三个问题了吧
以上仅供参考
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4楼2010-09-27 10:14:50
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zhouxiaohua

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
同时学习了
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5楼2010-09-27 10:29:09
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girlfisher

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
silicare(金币+2):理论和现实直接的差距足够某些细菌存活并繁衍了 2010-09-27 12:03:07
你的琼脂灭菌以后不可避免的产生一些可被细菌利用的碳源物质，以你的实验精度不可能做到排除所有碳源物质的。即使在你使用超纯水配制你的盐溶液也会有大约几百微克每升的有机碳含量。

另外日本的琼脂也不是什么黄金标准，最好的是Difco的
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6楼2010-09-27 11:50:31
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