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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 耐铬菌在培养基中加入铬就不生长了，请问是什么原因
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xufen1985

金虫 (正式写手)

[求助] 耐铬菌在培养基中加入铬就不生长了，请问是什么原因

大家好，我现在正在做微生物还原铬的实验，通过鉴定我选取的微生物为芽孢杆菌，以前我是选用LB培养基来做还原实验的，还原效果不错。但是我现在想研究碳源对微生物还原铬的影响，于是我选择了一种无机培养基—M9培养基。利用氯化铵作为氮源，葡萄糖为碳源，在不加入六价铬的时候微生物可以生长，但是当我加入铬时微生物就不生长了，我怀疑是不是我用的无机氮源有问题，是否需要换为有机氮源，但是在不引人碳源的情况下换成什么样的氮源呢？我不是微生物专业的，希望各位能给我一些意见，谢谢哦！
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好好学习、天天向上
1楼2012-02-19 10:54:47
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

dgr69

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LB培养基和M9培养基成分是不一样的，LB培养基成分主要是胰化蛋白胨和酵母提取物，氨基酸的成分比较多，而M9培养基主要成分为氯化铵和葡萄糖，成分不一样，意味着内部新陈代谢的路径不一样，铬抑制的代谢路径是固定的，但利用不同营养物质的代谢路径是不一样的，所以会造成在LB培养基中不抑制，而在M9培养基中抑制。你可以查一下相关资料，看一看氨基酸的代谢路径和葡萄糖的代谢路径有什么不同，再查一下铬主要抑制那个位点，这样可能会解决你的问题。
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大山之巅
4楼2012-02-21 08:37:32
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pacify

木虫 (著名写手)
zhang8826857(金币+3): 鼓励交流 2012-02-20 16:53:04
学化学的路过说点看法，可能不重要。注意到你加入的是6价铬，铬的氧化性与ph关系非常紧密。碱性环境下基本不具氧化性，但酸性越强氧化性越强。这个你可以想象洗液是用浓硫酸和重铬酸钾配的，就可以明白氧化性问题。
然后我看到你用的氮源是强酸弱碱盐，也就是酸性的，虽然在化学反应中这种ph条件不会提供强氧化环境，但生物的耐氧化性我是不知道的，应该考量一下。再者化学反应经常强调反应时间问题，有事仅仅是介于有害与无害之间，但时间长了可能结果也不好说。至于你培养细菌用多长时间我就不知道了，个人感觉时间应该相当长的。
提供两点参考，呵呵
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3楼2012-02-20 12:42:40
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献

【答案】应助回帖

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7楼: Originally posted by xufen1985 at 2012-02-21 09:22:17:
我的那个菌耐铬浓度还是相当高的，在LB培养基中耐铬浓度超过了200mg/L,但是在M9培养基中加了25mg/L的铬它就不生长了，后来我在培养基中加了一点酵母膏，微生物就很好的生长了。

缺少刺激因子，试试加点维生素混合物。
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
8楼2012-02-21 11:58:42
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dgr69

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【答案】应助回帖

xufen1985(金币+10): ★★★很有帮助 2012-02-22 21:40:30
引用回帖:
5楼: Originally posted by xufen1985 at 2012-02-21 09:16:33:
谢谢你的解释，昨天我在含铬的M9培养基中加了一点酵母膏，微生物很快就长出来了，这个能不能说明在含铬溶液中无机氮不能被利用，而有机氮可以被利用，因此微生物可以生长？

酵母浸膏（酵母膏）是采用新鲜酵母为原料，经酵母酶解自溶、分离过滤、浓缩而得到的一种棕黄色至棕褐色的膏状物。有酵母自然香味，易溶于水，水溶液呈淡黄色至浅棕色，较澄清。酵母浸膏富含蛋白质、氨基酸类、肽类、核苷酸、B族维生素、微量元素。主要作用是补充氮源和提供微生物生长的各种维生素及氨基酸及生长因子。一般的用量为0.2%～2.0%。
_____________________________________________________________________
可以这样讲吧。如果想再进一步确认，你可以试一试氨基酸，在M9培养基中加入氨基酸来做一下试验。
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大山之巅
10楼2012-02-21 21:35:45
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普通回帖

wjf008

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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zhang8826857(金币+2): 鼓励交流 2012-02-20 16:53:09
氮源是基本不会有问题的。既然是耐铬菌，那么需要考虑的就是菌种纯度问题还有耐受浓度问题，浓度过高会造成菌落不生长。
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2楼2012-02-20 12:14:59
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xufen1985

金虫 (正式写手)
引用回帖:
楼: Originally posted by dgr69 at 2012-02-21 08:37:32:
LB培养基和M9培养基成分是不一样的，LB培养基成分主要是胰化蛋白胨和酵母提取物，氨基酸的成分比较多，而M9培养基主要成分为氯化铵和葡萄糖，成分不一样，意味着内部新陈代谢的路径不一样，铬抑制的代谢路径是固定 ...

谢谢你的解释，昨天我在含铬的M9培养基中加了一点酵母膏，微生物很快就长出来了，这个能不能说明在含铬溶液中无机氮不能被利用，而有机氮可以被利用，因此微生物可以生长？
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好好学习、天天向上
5楼2012-02-21 09:16:33
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xufen1985

金虫 (正式写手)
引用回帖:
楼: Originally posted by pacify at 2012-02-20 12:42:40:
学化学的路过说点看法，可能不重要。注意到你加入的是6价铬，铬的氧化性与ph关系非常紧密。碱性环境下基本不具氧化性，但酸性越强氧化性越强。这个你可以想象洗液是用浓硫酸和重铬酸钾配的，就可以明白氧化性问题 ...

谢谢你哦，你的意见我会好好考虑的
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好好学习、天天向上
6楼2012-02-21 09:19:45
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xufen1985

金虫 (正式写手)
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楼: Originally posted by wjf008 at 2012-02-20 12:14:59:
氮源是基本不会有问题的。既然是耐铬菌，那么需要考虑的就是菌种纯度问题还有耐受浓度问题，浓度过高会造成菌落不生长。

我的那个菌耐铬浓度还是相当高的，在LB培养基中耐铬浓度超过了200mg/L,但是在M9培养基中加了25mg/L的铬它就不生长了，后来我在培养基中加了一点酵母膏，微生物就很好的生长了。
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好好学习、天天向上
7楼2012-02-21 09:22:17
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dgr69

捐助贵宾 (小有名气)
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5楼: Originally posted by xufen1985 at 2012-02-21 09:16:33:
谢谢你的解释，昨天我在含铬的M9培养基中加了一点酵母膏，微生物很快就长出来了，这个能不能说明在含铬溶液中无机氮不能被利用，而有机氮可以被利用，因此微生物可以生长？

酵母浸膏（酵母膏）是采用新鲜酵母为原料，经酵母酶解自溶、分离过滤、浓缩而得到的一种棕黄色至棕褐色的膏状物。有酵母自然香味，易溶于水，水溶液呈淡黄色至浅棕色，较澄清。酵母浸膏富含蛋白质、氨基酸类、肽类、核苷酸、B族维生素、微量元素。主要作用是补充氮源和提供微生物生长的各种维生素及氨基酸及生长因子。一般的用量为0.2%～2.0%。
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可以这样讲吧。如果想再进一步确认，你可以试一试氨基酸，在M9培养基中加入氨基酸来做一下试验。
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大山之巅
9楼2012-02-21 21:33:51
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