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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】原核表达蛋白分子量偏大
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恒星年

银虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
是不是载体前前后后有写赘余的序列被翻译了啊？4kda不是很大
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11楼2010-09-17 09:48:45
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辉辉集团

银虫 (正式写手)

谢谢

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 恒星年 at 2010-09-17 09:48:45:
是不是载体前前后后有写赘余的序列被翻译了啊？4kda不是很大

谢谢
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12楼2010-09-17 10:38:09
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辉辉集团

银虫 (正式写手)
我们做的还有超过10K的呢  都有可能的
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13楼2010-09-17 10:39:33
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月月大可

木虫 (著名写手)
★ ★
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lstt09nk(金币+1):感谢回复~ 2010-09-17 17:09:42
引用回帖:
Originally posted by cgt713 at 2010-09-17 08:15:52:

如果可以有这么大的差异的话 那该怎么设计呢  我们现在做的蛋白都偏大啊

表观分子量和实际分子量有差异这是非常正常的现象，你只要确定是你的目的蛋白，而测序结果又没有问题直接往下进行试验。

想得到确定的答案可以考虑对蛋白的N端进行测序。
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14楼2010-09-17 13:36:50
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cgt713

银虫 (小有名气)

谢谢

引用回帖:
Originally posted by 月月大可 at 2010-09-17 13:36:50:


表观分子量和实际分子量有差异这是非常正常的现象，你只要确定是你的目的蛋白，而测序结果又没有问题直接往下进行试验。

想得到确定的答案可以考虑对蛋白的N端进行测序。

那外面的公司在买的表达蛋白 好像都没有什么偏差啊
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15楼2010-09-19 08:50:22
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gene001

金虫 (正式写手)

就是个普通教师
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我记得在SDS-PAGE电泳结果中出现分子量10%的差距是属于正常的！可你这个稍微大了点，也未必是蛋白质错误表达，可以纯化点样品测N端和C端氨基酸序列来验证表达的蛋白质的正确性！不过这样实验似乎费用和难度都很大！不过如果完成学位论文，我觉得值得做这些验证实验！
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大家共同交流、共同提高！！！
16楼2010-09-19 19:08:47
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cgt713

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by gene001 at 2010-09-19 19:08:47:
我记得在SDS-PAGE电泳结果中出现分子量10%的差距是属于正常的！可你这个稍微大了点，也未必是蛋白质错误表达，可以纯化点样品测N端和C端氨基酸序列来验证表达的蛋白质的正确性！不过这样实验似乎费用和难度都很大 ...

嗯 谢谢
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17楼2010-09-24 08:22:34
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cgt713

银虫 (小有名气)
18楼2010-09-26 08:36:54
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