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cgt713

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】原核表达蛋白分子量偏大已有7人参与

当时设计的分子量是16K,表达出来蛋白跑SDS-PAGE 是20K,请帮忙解释下 谢谢
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cgt713

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by gene001 at 2010-09-19 19:08:47:
我记得在SDS-PAGE电泳结果中出现分子量10%的差距是属于正常的!可你这个稍微大了点,也未必是蛋白质错误表达,可以纯化点样品测N端和C端氨基酸序列来验证表达的蛋白质的正确性!不过这样实验似乎费用和难度都很大 ...

嗯 谢谢
17楼2010-09-24 08:22:34
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查看全部 18 个回答

xiaoyu9940

铜虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
有没有纯化标记什么的,你算在里面了吗 例如GST
2楼2010-09-16 15:08:33
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sfxt001

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
要算上Tag的大小,还有有时候算出来的分子量不一定准。
3楼2010-09-16 15:12:54
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月月大可

木虫 (著名写手)

二楼的,GST标签26KD

说句实话这种通过SDS-PAGE获取的表观分子量略大于理论分子量是很正常的现象。

你也要考虑起始密码子开始区有没有非你目的蛋白的氨基酸引入,下游是否引入终止密码子,没有引入下游也会有非你目的蛋白的氨基酸表达。
4楼2010-09-16 16:40:48
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