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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】定点突变引物设计问题
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tancf

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】定点突变引物设计问题

做定点突变引物设计要用专门的软件吗？大家有什么建议？
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1楼 2010-09-16 14:38:54
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sfxt001

木虫 (小有名气)
tancf(金币+1): 2010-09-16 14:53:01
你是用PCR法，利用引物突变的方式做突变么？
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2楼2010-09-16 14:42:57
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tancf

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by sfxt001 at 2010-09-16 14:42:57:
你是用PCR法，利用引物突变的方式做突变么？

是的，用stratagene的定点突变试剂盒。
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3楼2010-09-16 14:52:47
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sfxt001

木虫 (小有名气)
tancf(金币+2): 2010-09-16 15:08:55
引用回帖:
Originally posted by tancf at 2010-09-16 14:52:47:

是的，用stratagene的定点突变试剂盒。

那不需要什么软件，因为你要做的突变的点，限制了你的引物设计，有时候是没有多少选择的。做PCR的时候，酶一定要选好的，高保真高扩增效率的那种。
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4楼2010-09-16 15:01:22
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tancf

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by sfxt001 at 2010-09-16 15:01:22:

那不需要什么软件，因为你要做的突变的点，限制了你的引物设计，有时候是没有多少选择的。做PCR的时候，酶一定要选好的，高保真高扩增效率的那种。

哦，这样呀。我还下了一个点突变引物设计的软件可是研究半天还是不会用……高保真的pfu酶它试剂盒里面应该有带吧。谢谢你啦~
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5楼2010-09-16 15:08:44
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齐小燕子

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
能不能交流一下，我想知道这个是怎么做的，我还不会，谢谢啦！
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6楼2013-04-19 09:03:35
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齐小燕子

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by tancf at 2010-09-16 14:52:47
是的，用stratagene的定点突变试剂盒。

用试剂盒定点突变，但是那个引物怎么设计呢？求助，谢谢
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7楼2013-04-19 09:04:49
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gao19890724

铁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by 齐小燕子 at 2013-04-19 09:04:49
用试剂盒定点突变，但是那个引物怎么设计呢？求助，谢谢...

有设计软件，primer就可以，把序列复制进去，在突变位点上下移动，没有发夹结构的引物序列，然后把要突变的碱基改为你要的，看看有没有发夹结构，没有，一般就可以。
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8楼2014-07-10 14:35:02
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