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hopebiolqdhb金虫 (著名写手)
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【分享】植物组培的一些基础 已有1人参与
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1. 真菌： 室内真菌种类主要有芽枝孢霉属、曲霉属、铰链孢霉属、镰刀霉属、青霉属等，春、夏季，尤其是南方的梅雨时节，温暖潮湿，非常适合真菌生长。如果长期使用空调而不注意通风，可引起室内真菌污染。室内有空调比没有空调情况下曲霉菌落数多4倍。 2. 细菌 细菌是无孔不入的微生物，为避免细菌的侵袭，科学家曾尝试用抗微生物材料生产各种用品，但效果不十分理想，因为这些材料虽然能杀死细菌，却充满了化学物质。 3. 组织培养过程中的污染源 （1）户外风大菌类进屋机会多 （2）屋内太潮菌类繁衍多 （3）物品带菌多 （4）屋内不干净 （5）屋内清理带菌组培苗 （6）接种不正确 二、传播途径 （1）户外风传播 菌类细小如尘 随风飘散 由上下落 见湿就长 有风就有沙 有沙就有尘 有尘就有菌 菌尘混共存 （2）涡流传播 超净工作台上，摆放物品太多，当无菌风吹过时，就会在物品周围形成涡流群，菌类就会在涡流群中停留，从而降低净化效果，增加污染机会。 （3）接种传播 脏手每只带有细菌4万~40万，干净的手，指甲盖大小也有3200多个细菌。指甲缝可以窝藏30多种细菌。如果手上带菌较多，在操作过程中，就难免有菌落入培养基或植物材料上，而导致污染。另外，不正确操作也会增加污染机率掀盖生硬，灭菌不够，操作过慢等。接种过程应该轻开盖，火灭慢，操作快。 三、预防措施 （1）通风 经常开窗，保持室内空气流通可以使室内真菌数量减少。通风方法简便易行，应多使用。 （2）去湿 保持室内空气干燥，如使用空调“除湿”功能，也可减少真菌生长繁殖。 （3）光照 紫外线能杀灭或抑制真菌生长，对减少室内真菌污染大有好处。 （4）防霉 污染物品和污染培养基不要在培养室近距离开瓶洗刷。 四、污染原因判断及污染苗抢救 （1）若污染菌类是零星分散在培养基中，则可确定是人为引起的污染，比如培养基灭菌不彻底；超净工作台长时间不换滤网，致使净化能力降低；接种用具灭菌不彻底；操作不正确，动作生硬缓慢，开瓶时间太久，接种台摆放物品杂乱，操作中心在人体范围之内；接种室长期不灭菌，菌类太多。 （2）若污染菌类是从材料周围长起，则可证明是植物材料带菌引起。可能是接种用具灭菌不彻底，接种时材料被污染；或者是未及时发现污染苗，接种过程交叉感染； （3）若是外植体，菌类从材料培养基以上部分长起，而不是从培养基先长起，且发生在5天以后，则说明是材料带的内生菌。若从培养基以下开始长菌，发生时间较早，且有从里向外的趋势，则说明是切口引起的污染，原因有是灭完菌后，未剪去两个切口或虽剪但器具带菌； 抢救措施： （1）真菌污染后，如果已形成孢子，则必须经高压灭菌后扔掉，即使仅形成菌丝，菌丝能够达到材料内部，因此，真菌污染是灭绝性的。但若使细菌污染，由于细菌繁殖是靠芽孢，细菌不会弥散整个空间，因此只要及时发现，将材料上部未感菌的部分剪下转接，材料仍可以用。 （2）用抗生素等杀菌药剂的处理，虽有不少报道，但至今还未发现那种抗生素能够对各种菌都有效，并且常常也会影响植物材料的正常生长分化。另一些药剂，虽有的杀菌效果好，但往往容易引起盐害，也无法利用。 |
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