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xukun1176

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】我走高效液相色谱的基线为什么会这样?(现在可以看到图了) 已有8人参与

我用HPLC来分离多肽,用的柱子是C18
第一张图的流动相是:
   A:H20(含0.1%TFA)   B:乙腈(不含TFA)
第二和三张图的流动相是:
   A:H20(含0.1%TFA)   B:乙腈(含0.1%TFA)

洗脱条件均为:
                   A(%)             B(%)
0min                 95                   5
10min               95                   5
60min               0                   100
70min               0                   100
流速为1ml/min;

其中:第一张图与第二、三张图是分别在不同的地方走了,用的柱子也不同。
第三张图走的是制备型的C18,但是柱子材料和第二张图的完全一样。

那请问大家,为什么当我的目标峰出现后,基线总是会飘移呢?而且还是B中未加TFA的向下飘,加了TFA的向上漂,什么原因呢?那要怎么做才能抑制基线漂移呢?

另外,为什么走制备型的C18,我的目标峰会变成波浪状的山包呢?
谢谢!!!

(1)乙腈中未加TFA

(2)乙腈中加了TFA
(3)制备型C18,流动相条件和柱子填料与(2)图相同,乙腈中加了TFA


[ Last edited by xukun1176 on 2010-9-11 at 14:54 ]
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691530278

铜虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
是不是进气泡或者漏液,就算是梯度洗脱也不应该这样啊,梯度洗脱应该大部分是平的,从100%到10%时可能会有较大波动
11楼2012-01-17 16:04:15
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无风的小屋

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
LZ什么东东啊?看不到图片啊!
Nocross,nocrown.
2楼2010-09-11 13:54:32
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xukun1176

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 无风的小屋 at 2010-09-11 13:54:32:
LZ什么东东啊?看不到图片啊!

什么情况呢?我这里可以显示啊
3楼2010-09-11 14:07:57
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qdeev

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
感觉第三张图的样品像是没进到柱子中。。。很有可能是扎空了。。每次的结果都是这样子的?还是只是一次的结果?

基线漂移无解。。可能是柱子的问题,机子的问题。。不好说。。机子用的是什么牌子?
5楼2010-09-12 10:54:25
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