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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】大家看看我的蛋白胶是怎么了？
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shitousuiyue

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by liyan66007 at 2010-09-11 20:14:46:
是自己做的胶还是买的？要是自己做的估计是胶的问题

自己做的啊。
我也觉得是胶的问题，因为我每次都配12%的胶，跑起来却像15%的，但30%AA我是自己亲自配置的啊！
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有的道路又宽又大，没有约束，却是通向灭亡。
21楼2010-09-13 11:35:53
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
★
shitousuiyue(金币+1):谢谢参与
最上边的大跳带貌似没问题，怀疑是缓冲液
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22楼2010-09-13 12:05:36
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hyw455703205

铜虫 (正式写手)
★
shitousuiyue(金币+1):谢谢参与
来参观！
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河鱼吻
23楼2010-09-13 14:39:45
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liyan66007

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by shitousuiyue at 2010-09-13 11:35:53:


自己做的啊。
我也觉得是胶的问题，因为我每次都配12%的胶，跑起来却像15%的，但30%AA我是自己亲自配置的啊！

有可能是胶里进气泡了，也有凝胶冷却不均匀的原因
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24楼2010-09-13 17:29:53
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qiyingdd

★
shitousuiyue(金币+1):谢谢参与
看看将样品离心后再上一下上清，或者换换样品处理液
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25楼2010-09-14 16:00:01
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sfxt001

木虫 (小有名气)
★
shitousuiyue(金币+1):谢谢参与
确实难看，找你旁边实验室的跑的好看的哥们借瓶buffer，你再跑一次，要是还是难看就是你的原因，要是不难看了，就是buffer没配好。
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26楼2010-09-14 16:04:54
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cheo163

金虫 (小有名气)
★
shitousuiyue(金币+1):谢谢参与
你这是多大浓度的胶跑的，延长凝胶时间，感觉像胶没凝好
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27楼2010-09-14 16:34:27
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mango70803575

银虫 (小有名气)
★
shitousuiyue(金币+1):谢谢参与
你在电泳时采用哪种冷凝方式？是冰浴，还是4度，还是冷凝水？
另外，看这两张图，不知道你的样品有没有未溶解的小颗粒？这些小颗粒会造成拖尾的。
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过去的一切等于零，现在的一切从零开始！
28楼2010-09-14 20:17:22
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2009227004

金虫 (正式写手)
★
shitousuiyue(金币+1):谢谢参与
可能是胶的问题，配胶的溶液怎么保存，有没有长菌或者是胶没有混匀；也有可能是电泳液的问题，如果电泳液不干净的话，跑出来的有胶托尾现象很严重！再者，可能是上样蛋白的问题，如果蛋白浓度太高了，可以适当的稀释下！至于含盐量的话，我觉得影响不大，我平时都有拿盐析后的样去跑，都可以跑出来，就是浓度太高了，条带太粗太难看了。LZ可以试下！！！
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当别人都在假装正经的时候，我就假装不正经。
29楼2010-09-14 20:54:39
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gaojuan1985

新虫 (正式写手)
★
shitousuiyue(金币+1): 谢谢参与
要么是配胶的哪个试剂有问题，要么是电泳缓冲液有问题。仔细检查每个试剂是否过期，配比是否正确。
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30楼2013-03-01 18:26:53
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