【求助/交流】大家看看我的蛋白胶是怎么了？ - 分子生物 - 综合其他

有的道路又宽又大，没有约束，却是通向灭亡。

21楼2010-09-13 11:35:53

silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

MolEPI: 1
应助: 88 (初中生)
贵宾: 29.823
金币: 18946.3
散金: 24272
红花: 300
沙发: 88
帖子: 10222
在线: 1602.6小时
虫号: 948825
注册: 2010-01-26
专业: 摩尼教
管辖: 新药研发

★
shitousuiyue(金币+1):谢谢参与

最上边的大跳带貌似没问题，怀疑是缓冲液

22楼2010-09-13 12:05:36

hyw455703205

铜虫 (正式写手)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 301.7
散金: 33
红花: 2
帖子: 326
在线: 36.1小时
虫号: 1080364
注册: 2010-08-23
性别: GG
专业: 药剂学

★
shitousuiyue(金币+1):谢谢参与

来参观！

河鱼吻

23楼2010-09-13 14:39:45

liyan66007

木虫 (正式写手)

应助: 7 (幼儿园)
金币: 4154.9
散金: 627
红花: 2
帖子: 314
在线: 516.7小时
虫号: 1071510
注册: 2010-08-08
性别: GG
专业: 应用高分子化学与物理

引用回帖:

Originally posted by shitousuiyue at 2010-09-13 11:35:53:

自己做的啊。
我也觉得是胶的问题，因为我每次都配12%的胶，跑起来却像15%的，但30%AA我是自己亲自配置的啊！

有可能是胶里进气泡了，也有凝胶冷却不均匀的原因

赞一下

24楼2010-09-13 17:29:53

qiyingdd

应助: (幼儿园)
在线:
虫号: 654772

★
shitousuiyue(金币+1):谢谢参与

看看将样品离心后再上一下上清，或者换换样品处理液

25楼2010-09-14 16:00:01

sfxt001

木虫 (小有名气)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 3975.6
散金: 966
红花: 1
帖子: 250
在线: 251.5小时
虫号: 1075936
注册: 2010-08-17
专业: 病原细菌与放线菌生物学

★
shitousuiyue(金币+1):谢谢参与

确实难看，找你旁边实验室的跑的好看的哥们借瓶buffer，你再跑一次，要是还是难看就是你的原因，要是不难看了，就是buffer没配好。

26楼2010-09-14 16:04:54

cheo163

金虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 634.2
帖子: 111
在线: 20.1小时
虫号: 874201
注册: 2009-10-16
性别: MM
专业: 免疫生物学

★
shitousuiyue(金币+1):谢谢参与

你这是多大浓度的胶跑的，延长凝胶时间，感觉像胶没凝好

27楼2010-09-14 16:34:27

mango70803575

银虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 9
散金: 9
帖子: 59
在线: 1.9小时
虫号: 733356
注册: 2009-03-28
性别: MM
专业: 微生物资源与分类学

★
shitousuiyue(金币+1):谢谢参与

你在电泳时采用哪种冷凝方式？是冰浴，还是4度，还是冷凝水？
另外，看这两张图，不知道你的样品有没有未溶解的小颗粒？这些小颗粒会造成拖尾的。

过去的一切等于零，现在的一切从零开始！

28楼2010-09-14 20:17:22

2009227004

金虫 (正式写手)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 1054.4
散金: 48
沙发: 2
帖子: 397
在线: 70.7小时
虫号: 904146
注册: 2009-11-16
性别: GG
专业: 免疫生物学

★
shitousuiyue(金币+1):谢谢参与

可能是胶的问题，配胶的溶液怎么保存，有没有长菌或者是胶没有混匀；也有可能是电泳液的问题，如果电泳液不干净的话，跑出来的有胶托尾现象很严重！再者，可能是上样蛋白的问题，如果蛋白浓度太高了，可以适当的稀释下！至于含盐量的话，我觉得影响不大，我平时都有拿盐析后的样去跑，都可以跑出来，就是浓度太高了，条带太粗太难看了。LZ可以试下！！！

当别人都在假装正经的时候，我就假装不正经。

29楼2010-09-14 20:54:39

gaojuan1985

新虫 (正式写手)

应助: 57 (初中生)
金币: 75.5
散金: 839
红花: 8
帖子: 561
在线: 119.6小时
虫号: 1374933
注册: 2011-08-21
性别: MM
专业: 生物化学

★
shitousuiyue(金币+1): 谢谢参与

要么是配胶的哪个试剂有问题，要么是电泳缓冲液有问题。仔细检查每个试剂是否过期，配比是否正确。

赞一下

30楼2013-03-01 18:26:53