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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】大家看看我的蛋白胶是怎么了？
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马后富aineek

木虫 (正式写手)
★
shitousuiyue(金币+1):谢谢参与
我刚做SDS-PAGE也很好的，点样量也很重要的！浓缩胶的长度可以长一点！
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没有做不到的，只有想不到的！
11楼2010-09-11 11:22:50
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shitousuiyue

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by sdqzsdqz at 2010-09-11 10:30:51:
缓冲液用新的，然后降低温度（可以在4度跑，或者冰块降温）即可解决你的问题

你指的是那个缓冲液啊？
电泳缓冲液还是上样缓冲液？
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有的道路又宽又大，没有约束，却是通向灭亡。
12楼2010-09-11 13:53:44
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
看天(金币+2):鼓励分享 2010-09-11 20:32:02
引用回帖:
Originally posted by shitousuiyue at 2010-09-11 10:33:05:

？？？
蛋白样中的离子强度？
我以前做此种蛋白电泳时条带非常好的，就像PCR条带一样。

可能是你配胶的buffer或者running buffer或者蛋白样品的盐浓度过高了
先排除前面的情况吧
尤其是在调buffer的pH值的时候，不能加HCl过头了就狂加碱，然后发现过头又再加酸，如此反复，虽然pH是对了，但是离子强度就错了
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13楼2010-09-11 14:26:15
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新亮

银虫 (初入文坛)
★
shitousuiyue(金币+1):谢谢参与
胶浓度可能有问题
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14楼2010-09-11 18:38:14
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zhyzx

金虫 (小有名气)
★
shitousuiyue(金币+1):谢谢参与
考虑了一下，可能有两个原因：
1、做胶的梳孔不干净
2、电泳时，两块板之间的缓冲液是之前用过的，最后用没跑过电泳的缓冲液
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15楼2010-09-11 19:22:38
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liyan66007

木虫 (正式写手)
★
shitousuiyue(金币+1):谢谢参与
是自己做的胶还是买的？要是自己做的估计是胶的问题
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16楼2010-09-11 20:14:46
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sqhnsd

金虫 (正式写手)
★
shitousuiyue(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by yuruoyuxue at 2010-09-11 10:40:41:
感觉像胶的问题,同样的条带拐弯了.

样品中的盐浓度是不是高了？一般SDS胶不会有什么问题啊，如果有问题，一般是要么跑不动，要么跑的稍微丑点。
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17楼2010-09-11 20:19:56
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yuruoyuxue

木虫 (正式写手)

~！@#￥%&…&%￥#@！~
引用回帖:
Originally posted by sqhnsd at 2010-09-11 20:19:56:

样品中的盐浓度是不是高了？一般SDS胶不会有什么问题啊，如果有问题，一般是要么跑不动，要么跑的稍微丑点。

一个大块的应该是样品中的问题.我记得以前做的时候在加热的时候,时间过长以后就是这个样子的.
胶的密度不同的话会导致跑出来的拐弯了,在以前的实验当中,打气泡的时候虽然打碎了,但是跑出来就拐弯了.
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要努力活着，因为我们会死很久很久的！
18楼2010-09-11 21:08:55
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c3024034

银虫 (正式写手)
★
shitousuiyue(金币+1):谢谢参与
缓冲液的问题
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19楼2010-09-11 21:13:36
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幽蓝王子

新虫 (小有名气)
★
shitousuiyue(金币+1):谢谢参与
拖尾了，这个应该是胶的问题吧？
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我是你转身就忘记的路人甲凭什么让我陪你蹉跎到天涯
20楼2010-09-12 18:49:12
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