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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 问题已解决，谢谢
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qutao1720

金虫 (小有名气)

[交流] 问题已解决，谢谢

请教两个问题
1、做western调好的蛋白上样量，超低温冰箱放了两天，再做上样量就又不一致了，请问是什么原因啊（除了蛋白降解、没有混匀样品和每次加样加的不准的原因，因为别人做的都好好的），怎么解决？
2、GA处理时，将苗子种在含20uM的GA培养基中21天，Della蛋白还能保持降解状态吗？一般应该怎样处理，处理多久啊？
谢谢各位给予指导。

问题已解决，谢谢

[ Last edited by qutao1720 on 2011-2-10 at 15:45 ]

问题已解决，谢谢

[ Last edited by qutao1720 on 2011-2-10 at 15:45 ]
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1楼 2010-09-10 23:30:34
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plantaqp

金虫 (正式写手)
21天？怎么保证GA浓度，每天换新溶液？
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2楼2010-09-11 05:11:40
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qutao1720

金虫 (小有名气)
lstt09nk:如果你想要针对楼上的问题进行回复的话，最好引用他的帖子，这样可以通过帖子提示功能他就能看到了~要不然楼上的如果不重看这个帖子的话，很难看到你的回复的~ 2010-09-11 19:56:15
不保证，就让苗子在固体培养基上长着，21天后收，就是想知道等21天后GA还有作用没有，della蛋白还能保持降解状态不能？
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3楼2010-09-11 09:06:00
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sdqzsdqz

木虫 (著名写手)
★ ★
lstt09nk(金币+2):感谢回复~ 2010-09-11 20:23:39
qutao1720(金币+2): 2010-09-12 10:52:00
第一个问题，你可以一次定量好了，一次煮了，放-20即可

第二个问题，处理方式没问题的，有无降低需要你去验证的，尽管已有太多文献提及。
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4楼2010-09-11 10:38:02
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qutao1720

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by sdqzsdqz at 2010-09-11 10:38:02:
第一个问题，你可以一次定量好了，一次煮了，放-20即可

第二个问题，处理方式没问题的，有无降低需要你去验证的，尽管已有太多文献提及。

我是煮过的，放超低温，但是每次用上样量总是有变化，不知怎么解决，有没有遇到这种情况的？
文献上GA一般不处理这么长时间吧，我没有Della的抗体来检测啊。不知道有没有做过类似实验的？时间短的也可以，如果处理10天没有降解也行啊。
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5楼2010-09-12 10:51:48
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suwei658

银虫 (正式写手)
个人认为蛋白质每次上样需配制新的样品才可以。
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坚持到底就是胜利！
6楼2010-09-12 22:25:06
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