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qutao1720

金虫 (小有名气)

[交流] 问题已解决,谢谢

请教两个问题
1、做western调好的蛋白上样量,超低温冰箱放了两天,再做上样量就又不一致了,请问是什么原因啊(除了蛋白降解、没有混匀样品和每次加样加的不准的原因,因为别人做的都好好的),怎么解决?
2、GA处理时,将苗子种在含20uM的GA培养基中21天,Della蛋白还能保持降解状态吗?一般应该怎样处理,处理多久啊?
谢谢各位给予指导。

问题已解决,谢谢

[ Last edited by qutao1720 on 2011-2-10 at 15:45 ]

问题已解决,谢谢

[ Last edited by qutao1720 on 2011-2-10 at 15:45 ]
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plantaqp

金虫 (正式写手)

21天?怎么保证GA浓度,每天换新溶液?
2楼2010-09-11 05:11:40
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qutao1720

金虫 (小有名气)

lstt09nk:如果你想要针对楼上的问题进行回复的话,最好引用他的帖子,这样可以通过帖子提示功能他就能看到了~要不然楼上的如果不重看这个帖子的话,很难看到你的回复的~ 2010-09-11 19:56:15
不保证,就让苗子在固体培养基上长着,21天后收,就是想知道等21天后GA还有作用没有,della蛋白还能保持降解状态不能?
3楼2010-09-11 09:06:00
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sdqzsdqz

木虫 (著名写手)

★ ★
lstt09nk(金币+2):感谢回复~ 2010-09-11 20:23:39
qutao1720(金币+2): 2010-09-12 10:52:00
第一个问题,你可以一次定量好了,一次煮了,放-20即可

第二个问题,处理方式没问题的,有无降低需要你去验证的,尽管已有太多文献提及。
4楼2010-09-11 10:38:02
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qutao1720

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by sdqzsdqz at 2010-09-11 10:38:02:
第一个问题,你可以一次定量好了,一次煮了,放-20即可

第二个问题,处理方式没问题的,有无降低需要你去验证的,尽管已有太多文献提及。

我是煮过的,放超低温,但是每次用上样量总是有变化,不知怎么解决,有没有遇到这种情况的?
文献上GA一般不处理这么长时间吧,我没有Della的抗体来检测啊。不知道有没有做过类似实验的?时间短的也可以,如果处理10天没有降解也行啊。
5楼2010-09-12 10:51:48
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suwei658

银虫 (正式写手)

个人认为蛋白质每次上样需配制新的样品才可以。
坚持到底就是胜利!
6楼2010-09-12 22:25:06
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