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whoisthis

铁虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
andywang6137(金币+2):谢谢指点 2010-09-09 20:25:50
用 PCR MIX 并做个温度梯度能较快筛选出合适条件
11楼2010-09-09 16:56:19
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bigboy123

铜虫 (小有名气)

andywang6137(金币+3):呵呵,我后面做实验加入看看效果,谢谢! 2010-09-09 20:26:54
再给个金币吧,最后我那个什么意见绝对管用,呵呵!你不是第一个了。
供应PCR增量剂
12楼2010-09-09 19:15:31
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Lee_Py

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
很明显 不能回收 你的退火温度有问题(都不知道你引物的Tm值 并且你第一个图出现了非特异条带)建议你P个降落 或者梯度吧
13楼2010-09-09 22:58:58
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lirui8247461

新虫 (初入文坛)

★ ★
silicare(金币+2):谢谢新虫分享 2010-09-17 22:09:14
silicare:刚发现,您都注册三年了怎么才发了8帖啊 2010-09-17 22:09:42
你可以试试改改PCR的条件:ddH2O 20.5ul   天根Taq buffer 2.5ul  上游引物和下游引物各0.5ul,天根Taq酶0.2ul  模板0.5ul,这样试试看看怎么样。我一直都是这样做的。效果还是不错的
14楼2010-09-17 20:46:57
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guanjinyan87

铜虫 (小有名气)

15楼2012-11-27 21:49:54
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rrlgod

铁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
请问你的这个pcr问题解决了吗?我遇到相同的问题,但是之前我的二轮能p出来而且很亮,用以前的一轮pcr产物进行二轮pcr我现在还能重复出来,但是用最近的一轮pcr产物就出现跟你类似的问题了
16楼2013-01-01 03:42:27
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andywang6137

木虫 (著名写手)

引用回帖:
2416555楼: Originally posted by rrlgod at 2013-01-01 03:42:27
请问你的这个pcr问题解决了吗?我遇到相同的问题,但是之前我的二轮能p出来而且很亮,用以前的一轮pcr产物进行二轮pcr我现在还能重复出来,但是用最近的一轮pcr产物就出现跟你类似的问题了

产物稀释后做模板
17楼2013-01-01 19:22:51
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杜杜

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
第二次pcr的时候,模板量加体系总体积的1/10,循环数3-10个应该可以,试试吧
18楼2013-01-04 09:52:09
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