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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR结果不理想，请教高手。
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whoisthis

铁虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
andywang6137(金币+2):谢谢指点 2010-09-09 20:25:50
用 PCR MIX 并做个温度梯度能较快筛选出合适条件
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11楼2010-09-09 16:56:19
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bigboy123

铜虫 (小有名气)
andywang6137(金币+3):呵呵，我后面做实验加入看看效果，谢谢！ 2010-09-09 20:26:54
再给个金币吧，最后我那个什么意见绝对管用，呵呵！你不是第一个了。
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供应PCR增量剂
12楼2010-09-09 19:15:31
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Lee_Py

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
很明显 不能回收 你的退火温度有问题（都不知道你引物的Tm值 并且你第一个图出现了非特异条带）建议你P个降落 或者梯度吧
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13楼2010-09-09 22:58:58
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lirui8247461

新虫 (初入文坛)
★ ★
silicare(金币+2):谢谢新虫分享 2010-09-17 22:09:14
silicare:刚发现，您都注册三年了怎么才发了8帖啊 2010-09-17 22:09:42
你可以试试改改PCR的条件：ddH2O 20.5ul   天根Taq buffer 2.5ul  上游引物和下游引物各0.5ul，天根Taq酶0.2ul  模板0.5ul，这样试试看看怎么样。我一直都是这样做的。效果还是不错的
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14楼2010-09-17 20:46:57
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guanjinyan87

铜虫 (小有名气)
??
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15楼2012-11-27 21:49:54
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rrlgod

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
请问你的这个pcr问题解决了吗？我遇到相同的问题，但是之前我的二轮能p出来而且很亮，用以前的一轮pcr产物进行二轮pcr我现在还能重复出来，但是用最近的一轮pcr产物就出现跟你类似的问题了
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16楼2013-01-01 03:42:27
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andywang6137

木虫 (著名写手)
引用回帖:
2416555楼: Originally posted by rrlgod at 2013-01-01 03:42:27
请问你的这个pcr问题解决了吗？我遇到相同的问题，但是之前我的二轮能p出来而且很亮，用以前的一轮pcr产物进行二轮pcr我现在还能重复出来，但是用最近的一轮pcr产物就出现跟你类似的问题了

产物稀释后做模板
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17楼2013-01-01 19:22:51
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杜杜

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
第二次pcr的时候，模板量加体系总体积的1/10，循环数3-10个应该可以，试试吧
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18楼2013-01-04 09:52:09
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