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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】芽孢杆菌属的基因敲除方法
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fjt198719

木虫 (著名写手)

永远的菜鸟
可惜我明年毕业估计也做不到敲除那一步了
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独YY不如众YY！！！
11楼2010-10-22 19:24:17
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fjt198719

木虫 (著名写手)

永远的菜鸟
hkfgwww(金币+1):谢谢 2010-10-23 10:08:58
另外敲除所用质粒的话，可以用温敏型的如pE194了，不过这个质粒只能在芽胞杆菌中复制，所以要改造。另外可以直接用大肠质粒构建，然后单酶切用线性质粒转化，这样整合效果好，不过由于大肠质粒不能复制，也就是说转化和敲除必须一步成功，这样效率就更低了，不过我师姐就是这样成功的，相信肯定行
赞一下(1人) 回复此楼
独YY不如众YY！！！
12楼2010-10-22 19:32:07
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sun_681991

银虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
10楼: Originally posted by fjt198719 at 2010-10-22 19:23:09
芽胞杆菌转化都很困难别说敲除了，主要是因为自身的修饰系统会对外源质粒进行降解。我实验进展到目前，只构建了2株穿梭表达工程菌。我师姐有用古老的spizizen方法整合成功过，我没成功过，就是利用芽胞杆菌对数期自 ...

您好！请问你找到地衣芽孢杆菌基因敲除的方法了吗？？能不能交流一下？？
赞一下 回复此楼
我爱香菜!
13楼2016-03-02 09:21:45
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