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zycly86

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】求助CTAB缓冲液配法

马上开始提葡萄DNA 了,查了CTAB的缓冲液 :500μL CTAB [100mM Tris-Hcl(PH 8.0), 1.4M NaCl, 50mM EDTA, 2%CTAB及终浓度为3%的β-巯基乙醇] 再加入100μL 20% PVP充分混匀

希望大家指点一下, 越详细越好,有没有什么要注意的?
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虫子火箭兵

金虫 (正式写手)

zycly86(金币+2): 2010-09-02 23:14:42
2×CTAB buffer             配50mL
100mM Tris-Cl pH8.0     5 mL 1M 贮存液
1M储液 称取121.1gTris 加约42ml浓盐酸调PH至8.0再定容至1L,高温高压灭菌室温保存(注意调PH时应使溶液降温至室温)
1.4M NaCl                   17.5 mL 4M贮存液
20 mM EDTA pH8.0     2 mL 0.5M贮存液
0.5M储液加186.1gNa2EDTA.2H2O,加入20gNaOH调PH至8.0定容至1L,高温灭菌室温保存
2% CTAB                   需CTAB固体粉末1g
0.2%巯基乙醇             巯基乙醇100 μL(提取DNA时现用现加)
2楼2010-09-01 23:24:55
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冰鱼儿

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 虫子火箭兵 at 2010-09-01 23:24:55:
2×CTAB buffer             配50mL
100mM Tris-Cl pH8.0     5 mL 1M 贮存液
1M储液 称取121.1gTris 加约42ml浓盐酸调PH至8.0再定容至1L,高温高压灭菌室温保存(注意调PH时应使溶液降温至室温)
1.4M NaCl   ...

Tris-Cl 和EDTA需要高压灭菌吗?是必需的吗?
是在调Ph之前吗?
3楼2011-03-23 22:41:46
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wqj1988926

金虫 (正式写手)

恩,学习下
风雪夜归人
4楼2011-03-24 13:19:52
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雨山丰色

铁虫 (初入文坛)

配完CTAB后一起灭菌就行
5楼2011-03-24 14:00:22
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