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zycly86

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[交流] 【求助/交流】求助CTAB缓冲液配法

马上开始提葡萄DNA 了，查了CTAB的缓冲液：500μL CTAB [100mM Tris-Hcl(PH 8.0), 1.4M NaCl, 50mM EDTA, 2%CTAB及终浓度为3%的β-巯基乙醇] 再加入100μL 20% PVP充分混匀

希望大家指点一下，越详细越好，有没有什么要注意的？

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1楼 2010-09-01 22:30:33

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虫子火箭兵

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zycly86(金币+2): 2010-09-02 23:14:42

2×CTAB buffer          配50mL
100mM Tris-Cl pH8.0    5 mL 1M 贮存液
1M储液称取121.1gTris 加约42ml浓盐酸调PH至8.0再定容至1L,高温高压灭菌室温保存（注意调PH时应使溶液降温至室温）
1.4M NaCl                17.5 mL 4M贮存液
20 mM EDTA pH8.0    2 mL 0.5M贮存液
0.5M储液加186.1gNa2EDTA.2H2O,加入20gNaOH调PH至8.0定容至1L,高温灭菌室温保存
2% CTAB                需CTAB固体粉末1g
0.2%巯基乙醇          巯基乙醇100 μL（提取DNA时现用现加)

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2楼2010-09-01 23:24:55

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冰鱼儿

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引用回帖:

Originally posted by 虫子火箭兵 at 2010-09-01 23:24:55:
2×CTAB buffer 配50mL
100mM Tris-Cl pH8.0 5 mL 1M 贮存液
1M储液称取121.1gTris 加约42ml浓盐酸调PH至8.0再定容至1L,高温高压灭菌室温保存（注意调PH时应使溶液降温至室温）
1.4M NaCl ...

Tris-Cl 和EDTA需要高压灭菌吗？是必需的吗？
是在调Ph之前吗？

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3楼2011-03-23 22:41:46

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