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nancy1984

木虫 (小有名气)

[交流] HPLC用C18柱子再生问题

用C18柱子分析样品,但样品盒流动相均不含缓冲盐,想问大家怎么样冲洗能使色谱柱再生,提高柱效。

另外,冲洗色谱柱的时候,是不是把紫外检测仪关了冲洗比较好?
心随人愿~
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nancy1984

木虫 (小有名气)

★
sanko211(金币+1):很全面 2010-09-02 18:00:45
引用回帖:
Originally posted by caowangyou at 2010-08-31 15:08:01:
C18柱子清洗再生
用下列10倍柱体积的溶剂清洗:(正向冲洗时流速:0.5ml/min)
95%水:5%乙腈(或甲醇)
(去除缓冲盐)
如系统没有梯度功能中间增加5倍柱体积50%水:50%乙腈(或甲醇)冲洗步骤。
95% 乙 ...

最后保存在35%水:65%乙腈中(或甲醇)。

反相色谱柱不能保存在水中吧?
心随人愿~
3楼2010-08-31 14:32:16
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caowangyou

木虫 (著名写手)

nancy1984(金币+1, 博学EPI+1):谢谢! 2010-08-31 15:20:09
C18柱子清洗再生
用下列10倍柱体积的溶剂清洗:(正向冲洗时流速:0.5ml/min)
95%水:5%乙腈(或甲醇)
(去除缓冲盐)
如系统没有梯度功能中间增加5倍柱体积50%水:50%乙腈(或甲醇)冲洗步骤。
95% 乙腈(或甲醇):5%水
最后保存在35%水:65%乙腈中(或甲醇)。
如是Phenomenex柱子可以反冲,但流速一点要控制在0.2ml/min之内。
如还有疑问,可以发邮件给我,jiangxinyue003@163.com
是我的我没抓住,不是我的我抓不住!
2楼2010-08-31 14:08:01
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sometimesin

木虫 (著名写手)

nancy1984(金币+1):谢谢! 2010-09-01 10:00:50
引用回帖:
Originally posted by nancy1984 at 2010-08-31 14:32:16:


最后保存在35%水:65%乙腈中(或甲醇)。

反相色谱柱不能保存在水中吧?

什么叫反相柱?你搞懂了吗?
温水煮蛙-飞天猫猫
4楼2010-08-31 21:36:31
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nancy1984

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by sometimesin at 2010-08-31 22:36:31:


什么叫反相柱?你搞懂了吗?

色谱柱的保存
(1)反相色谱柱每天实验后的保养:使用缓冲液或含盐的流动相,实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟,洗掉色谱柱中的盐,再用甲醇冲洗30分钟。注意:不能用纯水冲洗柱子,应该在水中加入10%的甲醇,防止将填料冲塌陷。
(2)长期保存色谱柱:如色谱柱要长时间保存,必须存于合适的溶剂下。对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中,正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中,离子交换柱可以储存于水(含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞)中,并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。储存的温度最好是室温

不应该是这样吗?
心随人愿~
5楼2010-09-01 09:04:27
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