应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台» 网络生活区» 有奖问答 » 有奖问答完结子版 » HPLC用C18柱子再生问题
91/1返回列表
查看: 2564  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 博学EPI ，点击这里进行查看

nancy1984

木虫 (小有名气)

[交流] HPLC用C18柱子再生问题

用C18柱子分析样品，但样品盒流动相均不含缓冲盐，想问大家怎么样冲洗能使色谱柱再生，提高柱效。

另外，冲洗色谱柱的时候，是不是把紫外检测仪关了冲洗比较好？
回复此楼

» 猜你喜欢
心随人愿~
1楼 2010-08-31 14:02:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

caowangyou

木虫 (著名写手)
nancy1984(金币+1, 博学EPI+1):谢谢！ 2010-08-31 15:20:09
C18柱子清洗再生
用下列10倍柱体积的溶剂清洗：（正向冲洗时流速：0.5ml/min）
95%水：5%乙腈(或甲醇)
（去除缓冲盐）
如系统没有梯度功能中间增加5倍柱体积50%水：50%乙腈（或甲醇）冲洗步骤。
95% 乙腈（或甲醇）：5%水
最后保存在35%水：65%乙腈中（或甲醇）。
如是Phenomenex柱子可以反冲，但流速一点要控制在0.2ml/min之内。
如还有疑问，可以发邮件给我，jiangxinyue003@163.com
赞一下 回复此楼
是我的我没抓住，不是我的我抓不住！
2楼2010-08-31 14:08:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nancy1984

木虫 (小有名气)
★
sanko211(金币+1):很全面 2010-09-02 18:00:45
引用回帖:
Originally posted by caowangyou at 2010-08-31 15:08:01:
C18柱子清洗再生
用下列10倍柱体积的溶剂清洗：（正向冲洗时流速：0.5ml/min）
95%水：5%乙腈(或甲醇)
（去除缓冲盐）
如系统没有梯度功能中间增加5倍柱体积50%水：50%乙腈（或甲醇）冲洗步骤。
95% 乙 ...

最后保存在35%水：65%乙腈中（或甲醇）。

反相色谱柱不能保存在水中吧？
赞一下(1人) 回复此楼
心随人愿~
3楼2010-08-31 14:32:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sometimesin

木虫 (著名写手)
nancy1984(金币+1):谢谢！ 2010-09-01 10:00:50
引用回帖:
Originally posted by nancy1984 at 2010-08-31 14:32:16:


最后保存在35%水：65%乙腈中（或甲醇）。

反相色谱柱不能保存在水中吧？

什么叫反相柱？你搞懂了吗？
赞一下 回复此楼
温水煮蛙-飞天猫猫
4楼2010-08-31 21:36:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nancy1984

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by sometimesin at 2010-08-31 22:36:31:


什么叫反相柱？你搞懂了吗？

色谱柱的保存
（1）反相色谱柱每天实验后的保养：使用缓冲液或含盐的流动相，实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟，洗掉色谱柱中的盐，再用甲醇冲洗30分钟。注意：不能用纯水冲洗柱子，应该在水中加入10%的甲醇，防止将填料冲塌陷。
（2）长期保存色谱柱：如色谱柱要长时间保存，必须存于合适的溶剂下。对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中，正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中，离子交换柱可以储存于水（含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞）中，并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。储存的温度最好是室温

不应该是这样吗？
赞一下 回复此楼
心随人愿~
5楼2010-09-01 09:04:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

致死之眠

金虫 (知名作家)

梦幻初音
nancy1984(金币+1):谢谢！ 2010-09-02 17:21:12
引用回帖:
Originally posted by nancy1984 at 2010-09-01 09:04:27:


色谱柱的保存
（1）反相色谱柱每天实验后的保养：使用缓冲液或含盐的流动相，实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟，洗掉色谱柱中的盐，再用甲醇冲洗30分钟。注意：不能用纯水冲洗柱子，应该在水中加入10% ...

完全正确，反相柱流动相可以有水，但是长期保持在含水溶剂中就废了
赞一下 回复此楼
Iamendlishdi,Myenglishisveryhaoveryqiangda
6楼2010-09-01 10:18:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jingmx2008

金虫 (小有名气)
nancy1984(金币+1):谢谢！ 2010-09-02 17:21:41
柱效不高，有可能是柱头被污染脏了，最好的办法还是用10%的甲醇水冲洗30min，然后用90%的乙腈水冲洗30min，最终保存在在甲醇中，这种办法一般是应用去柱子使用时间较长，不处理就不能用的状态时采用
赞一下 回复此楼
7楼2010-09-01 10:33:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sometimesin

木虫 (著名写手)
nancy1984(金币+1):谢谢！ 2010-09-02 17:22:02
引用回帖:
Originally posted by nancy1984 at 2010-09-01 09:04:27:


色谱柱的保存
（1）反相色谱柱每天实验后的保养：使用缓冲液或含盐的流动相，实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟，洗掉色谱柱中的盐，再用甲醇冲洗30分钟。注意：不能用纯水冲洗柱子，应该在水中加入10% ...

是不是最终保存在甲醇还是水溶液中，这与柱子有关。每根柱子都有其说明，比如使用要求、保养、清洗、再生。
我使用的反相C18柱，说明书就要求保存在水相中, avoid MeOH!所以我觉得不一定一概而论，看柱子的说明书。有些时候比如菲罗门的柱子，他们给每根柱子都准备了相应的说明书，有时候跟我们手上拿到的通用说明书都不一样的
赞一下 回复此楼
温水煮蛙-飞天猫猫
8楼2010-09-02 15:59:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nancy1984

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by sometimesin at 2010-09-02 16:59:16:




是不是最终保存在甲醇还是水溶液中，这与柱子有关。每根柱子都有其说明，比如使用要求、保养、清洗、再生。
我使用的反相C18柱，说明书就要求保存在水相中, avoid MeOH!所以我觉得不一定一概而论，看柱子 ...

谢谢你的提醒。
回复此楼
心随人愿~
9楼2010-09-02 16:22:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 nancy1984 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 315分，诚求调剂，材料与化工085600 +3 13756423260 2026-03-22 3/150 2026-03-22 20:11 by edmund7
[考研] 289求调剂 +7 怀瑾握瑜l 2026-03-20 7/350 2026-03-22 15:57 by ColorlessPI
[考研] 291 求调剂 +3 化工2026届毕业� 2026-03-21 3/150 2026-03-22 14:26 by ColorlessPI
[考研] 一志愿北京化工大学070300 学硕336求调剂 +5 vv迷 2026-03-21 8/400 2026-03-22 14:20 by ColorlessPI
[考研] 资源与环境 调剂申请(333分) +5 holy J 2026-03-21 5/250 2026-03-21 22:42 by Catalysis25
[考研] 313求调剂 +4 肆叁贰壹22 2026-03-19 4/200 2026-03-21 17:33 by ColorlessPI
[考研] 307求调剂 +3 余意卿 2026-03-18 3/150 2026-03-21 17:31 by ColorlessPI
[考研] 299求调剂 +5 shxchem 2026-03-20 7/350 2026-03-21 17:09 by ColorlessPI
[考研] 一志愿山大07化学 332分 四六级已过 本科山东双非 求调剂！ +3 不想理你 2026-03-16 3/150 2026-03-21 03:59 by JourneyLucky
[考研] 083200学硕321分一志愿暨南大学求调剂 +3 innocenceF 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:35 by JourneyLucky
[考研] 材料 336 求调剂 +3 An@. 2026-03-18 4/200 2026-03-21 01:39 by JourneyLucky
[考研] 324分 085600材料化工求调剂 +4 llllkkkhh 2026-03-18 4/200 2026-03-21 01:24 by JourneyLucky
[考研] 295求调剂 +4 一志愿京区211 2026-03-18 6/300 2026-03-20 23:41 by JourneyLucky
[考研] 317求调剂 +5 申子申申 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:26 by JourneyLucky
[考研] 一志愿苏州大学材料求调剂，总分315（英一） +5 sbdksD 2026-03-19 5/250 2026-03-20 22:10 by luoyongfeng
[考研] 286求调剂 +6 lemonzzn 2026-03-16 10/500 2026-03-19 14:31 by lemonzzn
[考研] 材料考研调剂 +3 xwt。 2026-03-19 3/150 2026-03-19 11:22 by w沐阳w
[考研] 【同济软件】软件（085405）考研求调剂 +3 2026eternal 2026-03-18 3/150 2026-03-18 19:09 by 搏击518
[考研] 收复试调剂生 +4 雨后秋荷 2026-03-18 4/200 2026-03-18 14:16 by elevennnne
[考研] 275求调剂 +4 太阳花天天开心 2026-03-16 4/200 2026-03-17 10:53 by 功夫疯狂
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭