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zhhl2981

木虫 (职业作家)

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[交流] 【求助/交流】请教考马斯亮蓝溶液的配置已有3人参与

为什么配置的考马斯亮蓝溶液是蓝色的,正确的应该是棕红色的.

配置步骤为:

将100mg考马斯亮蓝G-250溶于50m1 95％乙醇，加入100ml浓磷酸，然后，用蒸馏水补充至200ml

请问哪里出了问题?谢谢

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1楼 2010-08-28 10:10:22

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ottolzm

木虫 (正式写手)

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★ ★ ★
silicare(金币+3):鼓励交流 2010-09-01 17:59:45
zhhl2981(金币+5):3q 2010-09-02 11:45:58

配制的时候我觉得你明显少了一步配制之后等溶解完全用定性滤纸过滤你就会发现配制前是偏蓝色的等过滤完之后就是棕色的溶液了还有保存的时候用棕色瓶子装避光保存然后最好在一个月内用完超过一个月的考马斯亮蓝G250溶液效果非常不好 (以上为本人亲身体会)

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10楼2010-09-01 16:57:09

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stheaven

铁杆木虫 (小有名气)

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★ ★
silicare(金币+2):很全面 2010-08-28 10:25:11
zhhl2981(金币+2):3q 2010-08-29 09:28:41

你是用来定量还是染色

考马斯亮蓝G250中的G就是Green，偏绿，属于快染，脱色脱的不彻底，主要用于蛋白质测定。它比考马斯亮蓝R250多两个甲基，λmax为590-610nm。染色灵敏度不如R250但比氨基黑高3倍。优点在于它在三氯乙酸中不溶而成胶体，能选择地染色蛋白而几乎无本底色。所以常用于需要重复性好和稳定的染色，适于作定量分析。

考马斯亮蓝R250中的R就是Red，偏红，属于慢染，脱色脱的完全，主要用于电泳染色。λmax=560―590nm。染色灵敏度比氨基黑高5倍。尤其适用于SDS电泳微量蛋白质染色。但蛋白质浓度超出一定范围时，对高浓度蛋白的染色不符合Beer定律，用作定量分析时要注意这点。

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不可以恨这个世界。因为你那么爱它它不会让你失望的。美丽的并非这个世界。而是接受了这个世界的你的眼神。