【求助/交流】基因组PCR老P不出目的带 - 分子生物 - 综合其他

每天进步一点点，持之以恒！

11楼2010-08-31 10:34:12

kangkang997

金虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 657.1
帖子: 56
在线: 8小时
虫号: 465528
注册: 2007-11-22
性别: MM
专业: 生物化学

延长时间是多少啊？

赞一下

12楼2010-09-06 15:34:45

wchuangqi

铜虫 (小有名气)

应助: 30 (小学生)
金币: 79.8
红花: 1
帖子: 139
在线: 143.4小时
虫号: 827947
注册: 2009-08-14
性别: GG
专业: 植物生理与生化

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

用试剂盒提取基因组DNA,用最普通的Taq酶扩一次试试，如果不行的话，估计就是引物的问题了

天道酬勤

13楼2010-09-07 10:34:02

liyan66007

木虫 (正式写手)

应助: 7 (幼儿园)
金币: 4154.9
散金: 627
红花: 2
帖子: 314
在线: 516.7小时
虫号: 1071510
注册: 2010-08-08
性别: GG
专业: 应用高分子化学与物理

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

引物二聚体出现比较正常，样品靠近点样孔可能是浓度太高

赞一下(2人)

14楼2010-09-07 12:33:05

zhangxn2010

木虫 (著名写手)

让一切随风飞翔

MolEPI: 1
应助: 14 (小学生)
金币: 2450.9
散金: 923
红花: 7
帖子: 2880
在线: 284小时
虫号: 972619
注册: 2010-03-16
专业: 神经生物学

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

你的退火温度可以再降降，同时换对引物确保基因组没问题，然后就是引物的问题了

一直向前！

15楼2010-09-07 12:49:48

陈思容

铜虫 (正式写手)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 15.7
散金: 19
红花: 1
帖子: 337
在线: 41.5小时
虫号: 826004
注册: 2009-08-11
专业: 病原真菌学

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

模板的问题，

16楼2010-09-07 16:06:28

qingzi8575

银虫 (正式写手)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 696.7
散金: 336
帖子: 333
在线: 179.9小时
虫号: 568681
注册: 2008-06-04
性别: MM
专业: 环境微生物学

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

退火温度到53 55度试试，我所有的基因基本都用这个温度退火，特异性也不错

17楼2010-09-07 16:22:03

张学涛50

银虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 1775
红花: 1
帖子: 36
在线: 57.6小时
虫号: 1083439
注册: 2010-08-27
性别: GG
专业: 细胞增殖、生长与分化

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

可以尝试加点BSA
把模板稀释一下

18楼2010-09-07 18:40:37

blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

MolEPI: 16
应助: 100 (初中生)
贵宾: 0.11
金币: 10635.1
散金: 155
红花: 30
沙发: 6
帖子: 3702
在线: 790.1小时
虫号: 614948
注册: 2008-09-28
专业: 植物学研究的新技术、新方

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

楼主还是换对引物看看吧！

jiayoubashaonian

19楼2010-09-07 19:28:37

jia1012428

铜虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 99.3
散金: 44
红花: 2
帖子: 217
在线: 23.1小时
虫号: 577116
注册: 2008-06-22
性别: GG
专业: 生物化工与食品化工

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

引物设计有问题

20楼2010-09-07 20:12:23