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gdongli8325

铁杆木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】构建超表达载体时引物的设计

现在要构建超表达载体。PCR扩增基因,正向引物是从ATG开始,但这对引物扩增不出基因。所以打算重新设计引物。所以在此想问一下,引物是否可以在ATG的上游设计?如果可以在哪个范围内比较合适?还有,上游是指基因组序列还是必须在UTR区域?请有经验的同学尽量把这三个问题都回答。
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banhf

新虫 (初入文坛)


silicare(金币+1):这个很关键 2010-08-26 13:41:22
gdongli8325(金币+2): 2010-08-26 13:53:07
可以在上游设计,但要注意千万不能移码!
3楼2010-08-26 13:15:33
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lixg

铁杆木虫 (正式写手)


silicare(金币+1):谢谢交流 2010-08-26 08:52:57
gdongli8325(金币+3): 2010-08-26 13:52:56
1.完全可以
2.只要是5‘UTR都行
3.mRNA的5’UTR(如果用cDNA为模板);如果该基因只有1个外显子,则可从基因组中ATG的上游设计引物。
2楼2010-08-26 08:43:29
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