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fyw921铜虫 (小有名气)
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[交流]
【讨论】细胞活性、毒性、增殖已有30人参与
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| 大家好！大家在做细胞实验的时候，怎么设计细胞活性、毒性、增殖实验的时间点啊，这三个实验有什么却别啊！谢谢大家！ |
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hygene
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
yusen_1982(金币+1):欢迎讨论！！！！！ 2010-10-08 14:13:55
americanyk:编辑内容 2010-10-08 09:57
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
yusen_1982(金币+1):欢迎讨论！！！！！ 2010-10-08 14:13:55
americanyk:编辑内容 2010-10-08 09:57
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细胞毒性是由细胞或者化学物质引起的单纯的细胞杀伤事件，不依赖于凋亡或坏死的细胞死亡机理。有时需要进行特定物质细胞毒性的检测，比如药物筛选。 细胞毒性检测主要是根据细胞膜通透性发生改变来进行的检测，常用以下几种方法： 1.MTT、XTT法：利用线粒体内部酶的活性，可以将特定的四唑盐类进行转化，然后通过酶标仪进行检测. 2.LDH的方法：通过检测细胞培养上清中LDH的酶活性，来检测细胞毒性 3.其它酶方法：如检测上清中碱性磷酸酶、酸性磷酸酶的活性等 细胞增殖能力分析试剂盒 原理：正常细胞代谢旺盛，其线粒体内的琥珀酸脱氢酶，可将四唑盐类物质（如 MTT、XTT、WST-1等 ）还原为紫色的结晶状的物质，沉积在细胞周围，然后通过酶标仪读取OD值，从而检测到细胞增值状态 荧光素发光法细胞生存能力检测 原理：腺苷酸激酶（AK）存在于所有真核和原核细胞的胞浆中，AK具有激活ADP生成ATP。当细胞受损后，细胞膜发生破损，AK会释放到培养上清中。该试剂盒利用荧光素酶和荧光素在ATP作用下可以发光，通过化学发光仪可以定量进行检测。 LDH法细胞毒性检测 原理：LDH（乳酸脱氢酶）是一种稳定的蛋白质，存在于正常细胞的胞质中，一旦细胞膜受损，LDH即被释放到细胞外； LDH催化乳酸形成丙酮酸盐，和INT（四唑盐类）反应形成紫色的结晶物质，可通过500nm酶标仪进行检测。通过检测细胞培养上清中LDH的活性，可判断细胞受损的程度. [ Last edited by americanyk on 2010-10-8 at 09:57 ] |
34楼2010-10-08 13:58:36
诺曼底1227
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2楼2010-08-25 11:19:21
dj04164
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3楼2010-08-25 16:06:52
dj04164
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americanyk(金币+2):Thank you 2010-08-26 07:41:07
fyw921(金币+3):谢谢 2010-08-27 09:51:21
shileinjut:欢迎常来论坛讨论！ 2010-11-17 12:27:06
americanyk(金币+2):Thank you 2010-08-26 07:41:07
fyw921(金币+3):谢谢 2010-08-27 09:51:21
shileinjut:欢迎常来论坛讨论！ 2010-11-17 12:27:06
| 新人不必给金币啦。细胞毒性，未必是一定会杀死细胞，任何离子浓度升高，环境因子变化到正常值以上，细胞应该都会有相应的反应，而增值大多数是细胞分裂、凋亡和坏死的一个综合过程在细胞数量上的表现。是动态的。增殖减缓，举个最简单的例子接触抑制，细胞会全部停留在G0-G1期的一个狭窄的范围内，还有我们身上的大部分细胞都是G0G1期并不增殖，但这些细胞并不是因为有毒而不增殖。 |
4楼2010-08-26 10:43:57