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fyw921

铜虫 (小有名气)

[交流] 【讨论】细胞活性、毒性、增殖已有30人参与

大家好!大家在做细胞实验的时候,怎么设计细胞活性、毒性、增殖实验的时间点啊,这三个实验有什么却别啊!谢谢大家!
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dj04164

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
yusen_1982(金币+1):欢迎讨论!!!!! 2010-10-08 14:14:41
americanyk(金币+1):谢谢回帖交流 2010-10-30 19:23:18
引用回帖:
Originally posted by 纳米shiny at 2010-09-28 09:53:41:
我也在做关于作为载体的纳米材料的实验,在做MTT实验时就发现随浓度和时间(24,48,72h)的延长,增殖率降低,我开始就以为可能是产生了细胞毒性,但我做流式,做氧化应激实验以及电镜下看细胞状态,发现没有凋亡, ...

流式做的凋亡是不是用Annxin V标的?如果是的话PI标记的时间一定要控制好,时间长了PI会向正常细胞内渗透。另外,各种方法标记凋亡都是有窗口的,时间点早了,晚了都看不到,建议这位朋友在选几个时间点做做凋亡,特别是24小时以内的。如果还看不见,既然增值率低了,是不是可以考虑一下周期,看看是不是有check point t阻滞。
再说氧化应激,不知道你是不是H2DCFDA标的氧自由基。如果是的话,这个实验挺不好把握,个人认为,文献里提供的方法有些不太可取, 如用显微镜看,流式做等等。Detection of Reactive Oxygen Species Induced by Radiation in Cells Using the Dichlorofluorescein Assay 这篇文献的处理方法还不错。
30楼2010-09-28 10:40:18
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诺曼底1227

铁杆木虫 (正式写手)

★ ★
zhangwj(金币+1):thanks 2010-08-25 12:40:06
americanyk(金币+1):Thank you 2010-08-25 09:56:01
fyw921(金币+2):谢谢 2010-08-25 18:00:59
shileinjut:欢迎常来论坛讨论! 2010-11-17 12:26:57
就我的感觉而言,一般先做24,48,72,96h这四个时间点,看一下细胞是不是持续增殖,如果是的,可以尝试做个7天的。
毒性和增殖貌似一般都是同一个实验,至于活性实验,就是另外一个实验了,现在最流行的好像是检测某种细胞的特定表达基因的情况
2楼2010-08-25 11:19:21
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dj04164

木虫 (正式写手)


americanyk(金币+1):Thank you 2010-08-25 09:55:53
fyw921(金币+3):太深奥! 2010-08-25 18:01:56
shileinjut:欢迎常来论坛讨论! 2010-11-17 12:27:02
引用回帖:
Originally posted by 诺曼底1227 at 2010-08-25 11:19:21:
就我的感觉而言,一般先做24,48,72,96h这四个时间点,看一下细胞是不是持续增殖,如果是的,可以尝试做个7天的。
毒性和增殖貌似一般都是同一个实验,至于活性实验,就是另外一个实验了,现在最流行的好像是检 ...

毒性和增殖差了很远。
有毒不一定会影响增殖哈。
增殖慢了也未必由于有毒。
3楼2010-08-25 16:06:52
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dj04164

木虫 (正式写手)

★ ★
americanyk(金币+2):Thank you 2010-08-26 07:41:07
fyw921(金币+3):谢谢 2010-08-27 09:51:21
shileinjut:欢迎常来论坛讨论! 2010-11-17 12:27:06
新人不必给金币啦。细胞毒性,未必是一定会杀死细胞,任何离子浓度升高,环境因子变化到正常值以上,细胞应该都会有相应的反应,而增值大多数是细胞分裂、凋亡和坏死的一个综合过程在细胞数量上的表现。是动态的。增殖减缓,举个最简单的例子接触抑制,细胞会全部停留在G0-G1期的一个狭窄的范围内,还有我们身上的大部分细胞都是G0G1期并不增殖,但这些细胞并不是因为有毒而不增殖。
4楼2010-08-26 10:43:57
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