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金虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】构建的载体找不到目的序列已有3人参与

各位高人有没有遇到这种情况的：
构建的载体PCR可以得到目的序列，然则做单酶切后于原质粒大小无异，双酶切后也看不到目的条带的存在。
载体有4500bp，目的条带500bp。
个人觉得，质粒提取后，其目的条带与载体的浓度应当相同，因此双酶切后既然质粒的条带非常清晰，为何目的序列的条带压根不见呢？

加油哦↖(^ω^)↗，O(∩_∩)O哈哈~

1楼 2010-08-19 15:53:28

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木虫 (正式写手)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

正常的，多切点看看，
酶切后浓度应该是4500:500，即9:1哦，所以载体条带可见，外源片段条带不可见

4楼2010-08-23 17:42:13

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