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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】转化时平板涂布后要放多久?
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oyanxuelai

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】转化时平板涂布后要放多久? 已有12人参与

转化时平板涂布后要放多久?
转化时,取200ul转化后的菌液在平板上涂布,要等五分钟还是十分钟?菌液干了,会不会影响转化后细菌的生长?我做转化后,不长菌,不知道是什么原因,请各位虫友们指点迷津!非常感谢!
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1楼 2010-08-19 10:47:47
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banhf

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
要看你连接的片段多大，是否超出载体的容量，如果没有的话就要考虑优化连接体系，一般体系中外源片段的量是载体量的3-4倍
还有一个问题就是感受态，要考虑感受态的效率问题
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13楼2010-08-19 17:17:44
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空谷幽风

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看天(金币+1):鼓励回答 2010-08-19 16:04:33
200ul不太容易涂干吧，可以4900ｒ/min离心5min后倒掉一部分上清，吹打混匀后涂板，涂完后可立刻放到培养箱，板子干了不影响结果
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a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
2楼2010-08-19 10:59:55
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wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
要看对照实验的…………
赞一下(1人) 回复此楼
金币是赌出来的
3楼2010-08-19 11:01:48
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oyanxuelai

银虫 (小有名气)
非常感谢!我那菌液是,5ulPCR产物酶切后的+100ul感受态细菌,进行转化后,再加600ul无抗生素的液态培养基.正对照长得很多,负对照没有长,就是实验组的不长
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4楼2010-08-19 11:07:34
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