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d8s8h46

[交流] 【求助/交流】检测样品当中核苷酸的含量。 已有3人参与

各位大侠,高手,近期俺要设计一个实验,但经过4、5天反复思考和查资料都没有找到太好的方案,遂进来赐教!

是这样的,有一个混合样品,已知里面含有蛋白质(少量)、多肽和游离氨基酸(占绝大部分≥50%)、核苷酸(可能有三种存在形式:核苷、核苷酸、碱基)、还有其他可溶性化合物质。

要求:检测样品当中核苷酸的含量。
疑难:由于样品中多肽和游离氨基酸含量较多,遂不能用紫外分光光度计法测量(蛋白质和核苷酸的吸光峰值很相近,只有在蛋白质含量(包括蛋白质、多肽和游离氨基酸)较少的情况下用此法才准确)。
         我的思路是,先把多肽和游离氨基酸与核苷酸分离开,然后再用紫外分光光度计法测量核苷酸含量。但本人才疏学浅,不知用什么方法才能把两者分离开。请各位赐教~~
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d8s8h46

有大侠知道吗?谢谢了。
2楼2010-08-19 10:48:19
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wjswj

木虫 (正式写手)

小木虫领金币专业户


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
用色谱会不会简单点?
金币是赌出来的
3楼2010-08-19 11:04:37
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看天

木虫 (知名作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by d8s8h46 at 2010-08-18 17:20:34:
各位大侠,高手,近期俺要设计一个实验,但经过4、5天反复思考和查资料都没有找到太好的方案,遂进来赐教!

是这样的,有一个混合样品,已知里面含有蛋白质(少量)、多肽和游离氨基酸(占绝大部分≥50%)、核 ...

核苷酸总量是吧 有专门的检测方法的 定磷
先定磷 再硫酸降解定总磷
戒嗔怒以养肝气,省言语以养神气,多读书以养质气,顺时令以养元气,不拘节以养大气,观天变以养灵气,莫强求规于运气。
4楼2010-08-19 12:29:11
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d8s8h46

引用回帖:
Originally posted by wjswj at 2010-08-19 11:04:37:
用色谱会不会简单点?

呵呵~~谢谢你的建议~~
但是我们公司没有GPC呢~~只有一台HPLC~~
其实最好能有简单的理化试验就能将它们分开,不需要用到色谱等精密的仪器分析方法(因为这些东东好贵哇~~)
5楼2010-08-19 15:25:26
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d8s8h46

引用回帖:
Originally posted by 看天 at 2010-08-19 12:29:11:

核苷酸总量是吧 有专门的检测方法的 定磷
先定磷 再硫酸降解定总磷

呵呵~~谢谢你的建议~~
但是我们公司没有GPC呢~~只有一台HPLC~~
其实最好能有简单的理化试验就能将它们分开,不需要用到色谱等精密的仪器分析方法(因为这些东东好贵哇~~)
6楼2010-08-19 15:25:39
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看天

木虫 (知名作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
定磷就是简单的理化实验 只需要分光光度计
戒嗔怒以养肝气,省言语以养神气,多读书以养质气,顺时令以养元气,不拘节以养大气,观天变以养灵气,莫强求规于运气。
7楼2010-08-19 15:52:09
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