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magicalkl

木虫 (正式写手)

与君共勉

[交流] 【求助】液相流动相缓冲液浓度有什么要求吗? 已有8人参与

如题,1.对于90%-95%的缓冲液:甲醇体系,对缓冲液的浓度有什么要求吗?主要是考虑析出的问题,盐溶液主要是磷酸盐,乙酸铵这种。
   
2.要是对于梯度洗脱缓冲液从95%变化至10%这种情况缓冲浓度又有什么要求呢?
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clyinsui

禁虫 (小有名气)

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opq691(金币+1):谢谢参与,欢迎常来分析版 2010-08-22 00:00:29
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2楼2010-08-17 10:19:02
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hec_selina

木虫 (小有名气)

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opq691(金币+1):谢谢参与,欢迎常来分析版 2010-08-22 00:00:36
不知道你的盐浓度是多少?
一般我们用的盐浓度不超过0.2mol/ml,浓度太过容易析出
3楼2010-08-17 11:24:28
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hongqianqian

银虫 (小有名气)

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opq691(金币+1):谢谢参与,欢迎常来分析版 2010-08-22 00:00:45
缓冲盐对柱子伤害大,能低尽量低,能不用尽量不用。一般从50 mmol/L试起。
缓冲盐最好不用梯度洗脱,如果用,则有机相比例不得高于60%。
快乐多多,好运多多~
4楼2010-08-17 11:27:12
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magicalkl

木虫 (正式写手)

与君共勉

引用回帖:
Originally posted by hongqianqian at 2010-08-17 11:27:12:
缓冲盐对柱子伤害大,能低尽量低,能不用尽量不用。一般从50 mmol/L试起。
缓冲盐最好不用梯度洗脱,如果用,则有机相比例不得高于60%。

那你们一般用什么来洗脱啊?
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5楼2010-08-17 11:53:27
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akosrios

铁杆木虫 (知名作家)

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opq691(金币+1):谢谢参与,欢迎常来分析版 2010-08-22 00:00:54
缓冲盐主要问题是可能在梯度洗脱时析出

这个可以自己做实验验证

不见得是缓冲盐越少越好,毕竟缓冲盐在某些分离上是作用很大的
中华人民共和国公民有言论、出版、集会、结社、游行、示威的自由。---中国人民共和国宪法二章三十五条
6楼2010-08-17 13:31:30
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zhangsibao

木虫 (正式写手)

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opq691(金币+2):谢谢参与,欢迎常来分析版 2010-08-22 00:01:03
首先,增加缓冲体系是为了组分分离的,加多少首先看分离度的影响。
其次、色谱柱是有耐受性的,即酸碱度,不能超过,否则会损害色谱柱。
第三、一般来说满足了上述两点,不会产生盐的析出问题。但是更换流动相造成的析出不在此列。
7楼2010-08-17 14:24:36
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magicalkl

木虫 (正式写手)

与君共勉

引用回帖:
Originally posted by akosrios at 2010-08-17 13:31:30:
缓冲盐主要问题是可能在梯度洗脱时析出

这个可以自己做实验验证

不见得是缓冲盐越少越好,毕竟缓冲盐在某些分离上是作用很大的

楼上的意思是在恒定体积比下就算是缓冲液浓度较高,也是可行的吗?就怕在外面是溶液,进了管路就析出了。。。(有可能不)
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8楼2010-08-17 15:08:46
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akosrios

铁杆木虫 (知名作家)

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opq691(金币+1):谢谢参与,欢迎常来分析版 2010-08-22 00:01:15
引用回帖:
Originally posted by magicalkl at 2010-08-17 15:08:46:


楼上的意思是在恒定体积比下就算是缓冲液浓度较高,也是可行的吗?就怕在外面是溶液,进了管路就析出了。。。(有可能不)

恒比例问题不大

梯度有可能析出
中华人民共和国公民有言论、出版、集会、结社、游行、示威的自由。---中国人民共和国宪法二章三十五条
9楼2010-08-17 15:12:06
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magicalkl

木虫 (正式写手)

与君共勉

引用回帖:
Originally posted by akosrios at 2010-08-17 15:12:06:



恒比例问题不大

梯度有可能析出

朋友能解释下在梯度下为什么会比外梯度混合更加容易析出吗?
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10楼2010-08-17 17:30:52
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