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辉辉集团

银虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】含咪唑的蛋白免疫兔子

请问下各位朋友,知不知道用含咪唑的蛋白去免疫兔子制备抗体有什么不利的影响,具体咪唑最好低于哪个浓度?我的蛋白是原核表达的,用镍柱纯化的,所以不可避免有咪唑,我在考虑要不要透析,再去免疫兔子。
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sqhnsd

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 三妹妹 at 2010-08-18 09:00:51:


弱弱的问一下,表达出来的蛋白再拿去做抗体的目的是什么呀?我以前看到实验室他们做单链抗体,好像是直接用表达的蛋白建ELISA的??先谢谢那:)

我们做抗体是看蛋白质组数据是否可靠,一般做WB,做ELISA和IHC的抗体比较少,因为ELISA,IHC,对抗体要求比较高,比如特异性,滴度等条件。。。
11楼2010-08-18 10:55:25
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dianaofyezi

金虫 (正式写手)

最好是透析之后再免疫。
52187644
2楼2010-08-17 08:54:33
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sqhnsd

金虫 (正式写手)

★ ★ ★
scelab(金币+3):鼓励新虫!欢迎多来交流!:tiger06: 2010-08-17 16:22:56
引用回帖:
Originally posted by 辉辉集团 at 2010-08-17 08:27:13:
请问下各位朋友,知不知道用含咪唑的蛋白去免疫兔子制备抗体有什么不利的影响,具体咪唑最好低于哪个浓度?我的蛋白是原核表达的,用镍柱纯化的,所以不可避免有咪唑,我在考虑要不要透析,再去免疫兔子。

不用考虑,直接免疫就行了。兔子的耐受能力很强,8M urea等,都直接可以加进去。咪唑是小分子,它可以代谢掉,不会影响抗体制备的,很多公司的抗体都不取出咪唑的。
3楼2010-08-17 09:14:51
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jasco

木虫 (正式写手)


scelab(金币+1):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-08-17 16:23:11
不用透析的,直接上把,兔子很强大,对多抗没多大影响
4楼2010-08-17 09:16:28
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