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qian_me

[交流] 【求助/交流】转染后的Hela S3行免疫荧光后在显微镜下观察,无图像,失败原因探讨。 已有5人参与

我是分子生物实验新手,今天对转染后的Hela S3进行免疫荧光,然后在显微镜下观察,任何细胞的影子都没有,觉得奇怪的地方是,我想不出原因,因为此前进行两次类似的实验都有细胞成像,这次步骤上完全是重复以往的,除了转染的基因不同以外,其他都一样。上周五对细胞进行固定,分别应用4%PFA, 0.5% Triton X-20, 1% Perfect Blocking,进行固定,后存入冰箱冷藏,这周一开始加一抗和二抗,以及核染色。此前做过两次,步骤相同,都获成功,此次失败不知有哪些原因可以导致,请高手们指教!多谢!
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sikao

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
qian_me
您好!我准备做细胞的免疫荧光试验,但是细胞已经收集冻上了,请问该怎样制备细胞玻片,用什么固定剂呢,免疫荧光染色剂用什么呢?
谢谢啦!
6楼2012-03-21 20:53:27
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