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阳光金鱼唐金虫 (著名写手)
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[交流]
【求助/交流】5'Race反复做不出来，该怎么办 已有20人参与
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用TaKaRa的5'Full Race试剂盒扩5’端，目的片段1000bp左右，每次都是内外引物都扩不出任何条带（除了引物二聚体外）。我是严格按照说明书操作的，感觉步骤太长，颠来倒去的到最后什么都没有了，我该怎么办？ 谢谢大家了，这是很久以前的帖子了，我早就做出来了，用的TaKaRa的盒子，用的TaKaRa的盒子 [ Last edited by 阳光金鱼唐 on 2011-7-5 at 11:25 ] |
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阳光金鱼唐
金虫 (著名写手)
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操作要规范，一定要无菌操作，无RNA酶，退火温度用这个软件计算，在这个基础上减去5度，不放心就试试这个附近的温度http://sky.scnu.edu.cn/life/teac ... que/pcr_counter.htm 用平时的经验算退火温度做不出来的。 还有，PCR用的是高保真酶，我用的是TAKARA的盒子，配套的酶做不出来，换了高保真的酶就做出来了 |
55楼2012-05-22 15:11:25
ben1147
木虫 (正式写手)
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2楼2010-08-16 11:54:28
liyong1981 
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snzydong
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4楼2010-08-16 14:02:39
