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金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】电泳拖尾、、、已有2人参与

两个月前取大鼠肝脏，置于-80度冰箱保存，现在想提取RNA做RT-PCR,可是提了几次，琼脂糖凝胶电泳，RNA拖尾很严重，但28S和18S两个条带很亮，请问这样的RNA对后面的扩增有影响吗？拖尾严重是不是我放置时间太久了？怎样才能避免拖尾？谢谢啦~~~

1楼 2010-08-14 20:16:08

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木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+3):good！ 2010-08-14 22:23:55

RNase丰富的器官不建议长时间冻存，一般取了样就提RNA，反转之后冻存cDNA

不过有拖尾也不一定就是冻存引起的降解，也有可能提取过程中的问题

拿新鲜样品平行提取一下对比看看是提取过程中的降解还是保存引起的

有一点点拖尾问题不大，但是过于严重的话就不能用于下游实验了

2楼2010-08-14 22:11:07

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金虫 (小有名气)

嗯，谢谢高人指点啊

3楼2010-08-16 20:44:16

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