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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 综合其他 » 【资源】DNA制品的处理
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syhdeg

木虫 (小有名气)

[交流] 【资源】DNA制品的处理 已有5人参与

1.Q: Oligo DNA制品的形态?
A: Oligo DNA制品呈现白色粉末或无色透明均为正常形态。Oligo DNA制品为白色粉末或絮状物，一方面客户能肉眼观察到白色制品，另一方面保证Oligo DNA能即刻溶解。但由于Oligo DNA制品受空气中水份的影响，制品被潮解而吸附于离心管壁或管盖上，呈现无色透明状或难以观察到，遇到这种情况时请在使用前先离心收集Oligo DNA制品于管底，然后溶解Oligo DNA制品。

2.Q: 如何稀释Oligo DNA制品?
A: 收到Oligo DNA后，首先请短暂离心，收集Oligo DNA制品于管底，然后慢慢打开管盖，加适量的无菌超纯水或TE缓冲液，盖上管盖，充分上下振荡或用手指弹管底，使Oligo DNA充分溶解。相关的说明及数据请参照我公司的DNA合成报告单。


3.Q: 怎样制备100μM的储备液?
A: 体积（μl）=DNA合成报告单上的nmol数目×10

4.Q: Oligo DNA制品如何保存?
A: (1) Oligo DNA干燥制品很稳定，常温下可保存数月，但最好置于-20℃保存。
(2) 溶解后的DNA溶液可于4℃短期保存，长期保存请置于-20℃。在溶解和使用DNA溶液时，请避免核酸酶污染，尽量减少DNA溶液的反复冻融。
(3) 荧光标记Oligo DNA对光敏感，在日光下荧光强度会降低。为了保持荧光标记Oligo DNA的荧光效率，请于-20℃避光保存。

5.Q: Oligo DNA制品在常温下放置了一周还能正常工作吗？
A: Oligo DNA的干燥制品是非常稳定的，即便在溶液中也很稳定。一般情况下，只要没有核酸酶、细菌等的污染，Oligo DNA制品于常温下放置一周仍然能够正常工作，但长期保存请最好置于-20℃。

6.Q: Oligo DNA制品可以用琼脂糖凝胶电泳检测吗？
A: 由于化学合成的寡核苷酸所具有的特性，不能使用Agarose Gel及EB染色方法进行质量和浓度检测，必要时请使用变性PAGE电泳检测。主要原因如下：
(1) Oligos是单链DNA，容易形成立体结构。跑琼脂糖凝胶电泳时，容易出现多条带。
(2) Oligos为单链，而EB染色是嵌入到DNA双链的碱基之间。因此，单链DNA形成的立体结构越复杂，EB染色就越容易，DNA条带就越亮。如果单链DNA不形成立体结构，EB就无法染色。

7.Q: 长度相同、碱基组成不同的Oligo DNA进行变性PAGE电泳时，电泳带应该在同一位置吗？
A: 对于短链DNA来说，会有差异，但长链DNA差别很小，主要原因如下：
(1) A、G、T、C组成不同，电泳速度不同。
(2) DNA立体结构不同，电泳速度不同。
(3) 标记的荧光素不同。
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1楼 2010-08-12 10:39:36
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yuan0806

铁杆木虫 (著名写手)
shileinjut:欢迎交流！ 2010-11-29 12:02:08
dingyige
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一壶浊酒喜相逢。古今多少事，都付笑谈中。
2楼2010-11-02 11:06:00
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luckyna

木虫 (小有名气)
shileinjut:欢迎交流！ 2010-11-29 12:02:13
学习了
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3楼2010-11-03 09:14:04
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wenjingmin

银虫 (小有名气)
shileinjut:欢迎交流！ 2010-11-29 12:02:17
好东西
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为自己加油。
4楼2010-11-08 10:42:15
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winter_gates

金虫 (正式写手)

生命过客
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
shileinjut:欢迎交流！ 2010-11-29 12:02:26
引用回帖:
Originally posted by syhdeg at 2010-08-12 10:39:36:
6.Q: Oligo DNA制品可以用琼脂糖凝胶电泳检测吗？
A: 由于化学合成的寡核苷酸所具有的特性，不能使用Agarose Gel及EB染色方法进行质量和浓度检测，必要时请使用变性PAGE电泳检测。主要原因如下：
(1) Oligos是单链DNA，容易形成立体结构。跑琼脂糖凝胶电泳时，容易出现多条带。
(2) Oligos为单链，而EB染色是嵌入到DNA双链的碱基之间。因此，单链DNA形成的立体结构越复杂，EB染色就越容易，DNA条带就越亮。如果单链DNA不形成立体结构，EB就无法染色。

部分正确，但不全对，Agarose Gel一样可以跑，毕竟还有很多相对特殊的电泳法，比如脉冲场，呵呵。
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For my life！
5楼2010-11-08 10:53:30
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xiaohaiyu

金虫 (正式写手)
shileinjut:欢迎交流！ 2010-11-29 12:02:31
谢谢啦！
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6楼2010-11-29 09:24:37
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