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【资源】DNA制品的处理 已有5人参与
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1.Q: Oligo DNA制品的形态? A: Oligo DNA制品呈现白色粉末或无色透明均为正常形态。Oligo DNA制品为白色粉末或絮状物，一方面客户能肉眼观察到白色制品，另一方面保证Oligo DNA能即刻溶解。但由于Oligo DNA制品受空气中水份的影响，制品被潮解而吸附于离心管壁或管盖上，呈现无色透明状或难以观察到，遇到这种情况时请在使用前先离心收集Oligo DNA制品于管底，然后溶解Oligo DNA制品。 2.Q: 如何稀释Oligo DNA制品? A: 收到Oligo DNA后，首先请短暂离心，收集Oligo DNA制品于管底，然后慢慢打开管盖，加适量的无菌超纯水或TE缓冲液，盖上管盖，充分上下振荡或用手指弹管底，使Oligo DNA充分溶解。相关的说明及数据请参照我公司的DNA合成报告单。 3.Q: 怎样制备100μM的储备液? A: 体积（μl）=DNA合成报告单上的nmol数目×10 4.Q: Oligo DNA制品如何保存? A: (1) Oligo DNA干燥制品很稳定，常温下可保存数月，但最好置于-20℃保存。 (2) 溶解后的DNA溶液可于4℃短期保存，长期保存请置于-20℃。在溶解和使用DNA溶液时，请避免核酸酶污染，尽量减少DNA溶液的反复冻融。 (3) 荧光标记Oligo DNA对光敏感，在日光下荧光强度会降低。为了保持荧光标记Oligo DNA的荧光效率，请于-20℃避光保存。 5.Q: Oligo DNA制品在常温下放置了一周还能正常工作吗？ A: Oligo DNA的干燥制品是非常稳定的，即便在溶液中也很稳定。一般情况下，只要没有核酸酶、细菌等的污染，Oligo DNA制品于常温下放置一周仍然能够正常工作，但长期保存请最好置于-20℃。 6.Q: Oligo DNA制品可以用琼脂糖凝胶电泳检测吗？ A: 由于化学合成的寡核苷酸所具有的特性，不能使用Agarose Gel及EB染色方法进行质量和浓度检测，必要时请使用变性PAGE电泳检测。主要原因如下： (1) Oligos是单链DNA，容易形成立体结构。跑琼脂糖凝胶电泳时，容易出现多条带。 (2) Oligos为单链，而EB染色是嵌入到DNA双链的碱基之间。因此，单链DNA形成的立体结构越复杂，EB染色就越容易，DNA条带就越亮。如果单链DNA不形成立体结构，EB就无法染色。 7.Q: 长度相同、碱基组成不同的Oligo DNA进行变性PAGE电泳时，电泳带应该在同一位置吗？ A: 对于短链DNA来说，会有差异，但长链DNA差别很小，主要原因如下： (1) A、G、T、C组成不同，电泳速度不同。 (2) DNA立体结构不同，电泳速度不同。 (3) 标记的荧光素不同。 |
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