24小时热门版块排行榜    

查看: 1759  |  回复: 5

syhdeg

木虫 (小有名气)

[交流] 【资源】DNA制品的处理 已有5人参与

1.Q: Oligo DNA制品的形态?
A: Oligo DNA制品呈现白色粉末或无色透明均为正常形态。Oligo DNA制品为白色粉末或絮状物,一方面客户能肉眼观察到白色制品,另一方面保证Oligo DNA能即刻溶解。但由于Oligo DNA制品受空气中水份的影响,制品被潮解而吸附于离心管壁或管盖上,呈现无色透明状或难以观察到,遇到这种情况时请在使用前先离心收集Oligo DNA制品于管底,然后溶解Oligo DNA制品。

2.Q: 如何稀释Oligo DNA制品?
A: 收到Oligo DNA后,首先请短暂离心,收集Oligo DNA制品于管底,然后慢慢打开管盖,加适量的无菌超纯水或TE缓冲液,盖上管盖,充分上下振荡或用手指弹管底,使Oligo DNA充分溶解。相关的说明及数据请参照我公司的DNA合成报告单。


3.Q: 怎样制备100μM的储备液?
A: 体积(μl)=DNA合成报告单上的nmol数目×10

4.Q: Oligo DNA制品如何保存?
A: (1) Oligo DNA干燥制品很稳定,常温下可保存数月,但最好置于-20℃保存。
(2) 溶解后的DNA溶液可于4℃短期保存,长期保存请置于-20℃。在溶解和使用DNA溶液时,请避免核酸酶污染,尽量减少DNA溶液的反复冻融。
(3) 荧光标记Oligo DNA对光敏感,在日光下荧光强度会降低。为了保持荧光标记Oligo DNA的荧光效率,请于-20℃避光保存。

5.Q: Oligo DNA制品在常温下放置了一周还能正常工作吗?
A: Oligo DNA的干燥制品是非常稳定的,即便在溶液中也很稳定。一般情况下,只要没有核酸酶、细菌等的污染,Oligo DNA制品于常温下放置一周仍然能够正常工作,但长期保存请最好置于-20℃。

6.Q: Oligo DNA制品可以用琼脂糖凝胶电泳检测吗?
A: 由于化学合成的寡核苷酸所具有的特性,不能使用Agarose Gel及EB染色方法进行质量和浓度检测,必要时请使用变性PAGE电泳检测。主要原因如下:
(1) Oligos是单链DNA,容易形成立体结构。跑琼脂糖凝胶电泳时,容易出现多条带。
(2) Oligos为单链,而EB染色是嵌入到DNA双链的碱基之间。因此,单链DNA形成的立体结构越复杂,EB染色就越容易,DNA条带就越亮。如果单链DNA不形成立体结构,EB就无法染色。

7.Q: 长度相同、碱基组成不同的Oligo DNA进行变性PAGE电泳时,电泳带应该在同一位置吗?
A: 对于短链DNA来说,会有差异,但长链DNA差别很小,主要原因如下:
(1) A、G、T、C组成不同,电泳速度不同。
(2) DNA立体结构不同,电泳速度不同。
(3) 标记的荧光素不同。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuan0806

铁杆木虫 (著名写手)

shileinjut:欢迎交流! 2010-11-29 12:02:08
dingyige
一壶浊酒喜相逢。古今多少事,都付笑谈中。
2楼2010-11-02 11:06:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

luckyna

木虫 (小有名气)

shileinjut:欢迎交流! 2010-11-29 12:02:13
学习了
3楼2010-11-03 09:14:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wenjingmin

银虫 (小有名气)

shileinjut:欢迎交流! 2010-11-29 12:02:17
好东西
为自己加油。
4楼2010-11-08 10:42:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

winter_gates

金虫 (正式写手)

生命过客


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
shileinjut:欢迎交流! 2010-11-29 12:02:26
引用回帖:
Originally posted by syhdeg at 2010-08-12 10:39:36:
6.Q: Oligo DNA制品可以用琼脂糖凝胶电泳检测吗?
A: 由于化学合成的寡核苷酸所具有的特性,不能使用Agarose Gel及EB染色方法进行质量和浓度检测,必要时请使用变性PAGE电泳检测。主要原因如下:
(1) Oligos是单链DNA,容易形成立体结构。跑琼脂糖凝胶电泳时,容易出现多条带。
(2) Oligos为单链,而EB染色是嵌入到DNA双链的碱基之间。因此,单链DNA形成的立体结构越复杂,EB染色就越容易,DNA条带就越亮。如果单链DNA不形成立体结构,EB就无法染色。

部分正确,但不全对,Agarose Gel一样可以跑,毕竟还有很多相对特殊的电泳法,比如脉冲场,呵呵。
For my life!
5楼2010-11-08 10:53:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaohaiyu

金虫 (正式写手)

shileinjut:欢迎交流! 2010-11-29 12:02:31
谢谢啦!
6楼2010-11-29 09:24:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 syhdeg 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +23 医学老男孩 2026-08-13 49/2450 2026-08-14 20:02 by zhaifei
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +8 a089 2026-08-07 8/400 2026-08-14 18:46 by beefly
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-14 18:36 by 正能量1斤
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[基金申请] 好奇怪的filecode +6 布布和一二 2026-08-08 7/350 2026-08-14 13:38 by Equinoxhua
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +10 Tide man 2026-08-10 11/550 2026-08-14 10:30 by 沁言学术
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
信息提示
请填处理意见