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shengkai.0

新虫 (初入文坛)

[求助] 多糖粗提物除蛋白

我在做多糖粗提物的纯化过程中除蛋白时，用Sevage试剂除蛋白，重复做了很多次，每次上层水相和下层有机相之间都有差不多量的蛋白，结果样液越来越少，每次两相之间还是那么多，请问各位大侠是怎么回事？真的有那么多蛋白吗？
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1楼 2010-08-11 16:40:29
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致死之眠

金虫 (知名作家)

梦幻初音

【答案】应助回帖

是从植物里提取的多糖还是动物，植物我会一点，动物不会
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Iamendlishdi,Myenglishisveryhaoveryqiangda
2楼2010-08-11 16:48:55
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shengkai.0

新虫 (初入文坛)
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Originally posted by 致死之眠 at 2010-08-11 16:48:55:
是从植物里提取的多糖还是动物，植物我会一点，动物不会

就是从香菇里面提取的
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3楼2010-08-11 18:40:32
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致死之眠

金虫 (知名作家)

梦幻初音

【答案】应助回帖

香菇多糖我没做过，但是植物里面都含有大量的多糖，我们做别的植物时提取时蛋白质都出不来的，你用的是萃取方法吧，蛋白质和多糖都是可溶于水的，萃取不太好吧，多糖一般用凝胶柱
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Iamendlishdi,Myenglishisveryhaoveryqiangda
4楼2010-08-12 11:26:53
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shengkai.0

新虫 (初入文坛)
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Originally posted by 致死之眠 at 2010-08-12 11:26:53:
香菇多糖我没做过，但是植物里面都含有大量的多糖，我们做别的植物时提取时蛋白质都出不来的，你用的是萃取方法吧，蛋白质和多糖都是可溶于水的，萃取不太好吧，多糖一般用凝胶柱

我是水提醇沉得到粗提物，然后再准备用凝胶色谱纯化得到单一级份的多糖做结构检测，你用凝胶色谱做过纯化吗？要是做过还想请教呢
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5楼2010-08-12 14:20:28
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致死之眠

金虫 (知名作家)

梦幻初音

【答案】应助回帖

葡聚糖凝胶柱那是用的相当的熟练了，可是液相上的凝胶柱老师说给我买，一直都没买，只看过相关的文献资料，就是老师给我买了也得照搬文献做，没什么理论知识储备
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Iamendlishdi,Myenglishisveryhaoveryqiangda
6楼2010-08-12 18:25:18
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shengkai.0

新虫 (初入文坛)
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Originally posted by 致死之眠 at 2010-08-12 18:25:18:
葡聚糖凝胶柱那是用的相当的熟练了，可是液相上的凝胶柱老师说给我买，一直都没买，只看过相关的文献资料，就是老师给我买了也得照搬文献做，没什么理论知识储备

呵呵，我准备自己买普通有机玻璃柱和葡聚糖凝胶做，用重整水泡凝胶并且作为多糖样品溶剂和洗脱剂，这样能纯化吗？谢谢指教
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7楼2010-08-12 18:50:12
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致死之眠

金虫 (知名作家)

梦幻初音

【答案】应助回帖

就是自己装柱自己跑呗，干天然药化的都是这么做的，当然能纯化啦，只有药物分析的才会买液相凝胶柱
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Iamendlishdi,Myenglishisveryhaoveryqiangda
8楼2010-08-12 19:02:52
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shengkai.0

新虫 (初入文坛)
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Originally posted by 致死之眠 at 2010-08-12 19:02:52:
就是自己装柱自己跑呗，干天然药化的都是这么做的，当然能纯化啦，只有药物分析的才会买液相凝胶柱

你用凝胶柱纯化过多糖吗？收集起来的液体怎么检测？是用苯酚硫酸法隔管检测吗？
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9楼2010-08-12 20:00:19
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致死之眠

金虫 (知名作家)

梦幻初音

【答案】应助回帖

我检测的是总多糖含量，用的比色法
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Iamendlishdi,Myenglishisveryhaoveryqiangda
10楼2010-08-12 20:03:41
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