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shengkai.0

新虫 (初入文坛)

[求助] 多糖粗提物除蛋白

我在做多糖粗提物的纯化过程中除蛋白时,用Sevage试剂除蛋白,重复做了很多次,每次上层水相和下层有机相之间都有差不多量的蛋白,结果样液越来越少,每次两相之间还是那么多,请问各位大侠是怎么回事?真的有那么多蛋白吗?
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shengkai.0

新虫 (初入文坛)

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Originally posted by 致死之眠 at 2010-08-11 16:48:55:
是从植物里提取的多糖还是动物,植物我会一点,动物不会

就是从香菇里面提取的
3楼2010-08-11 18:40:32
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shengkai.0

新虫 (初入文坛)

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Originally posted by 致死之眠 at 2010-08-12 11:26:53:
香菇多糖我没做过,但是植物里面都含有大量的多糖,我们做别的植物时提取时蛋白质都出不来的,你用的是萃取方法吧,蛋白质和多糖都是可溶于水的,萃取不太好吧,多糖一般用凝胶柱

我是水提醇沉得到粗提物,然后再准备用凝胶色谱纯化得到单一级份的多糖做结构检测,你用凝胶色谱做过纯化吗?要是做过还想请教呢
5楼2010-08-12 14:20:28
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shengkai.0

新虫 (初入文坛)

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Originally posted by 致死之眠 at 2010-08-12 18:25:18:
葡聚糖凝胶柱那是用的相当的熟练了,可是液相上的凝胶柱老师说给我买,一直都没买,只看过相关的文献资料,就是老师给我买了也得照搬文献做,没什么理论知识储备

呵呵,我准备自己买普通有机玻璃柱和葡聚糖凝胶做,用重整水泡凝胶并且作为多糖样品溶剂和洗脱剂,这样能纯化吗?谢谢指教
7楼2010-08-12 18:50:12
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shengkai.0

新虫 (初入文坛)

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Originally posted by 致死之眠 at 2010-08-12 19:02:52:
就是自己装柱自己跑呗,干天然药化的都是这么做的,当然能纯化啦,只有药物分析的才会买液相凝胶柱

你用凝胶柱纯化过多糖吗?收集起来的液体怎么检测?是用苯酚硫酸法隔管检测吗?
9楼2010-08-12 20:00:19
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shengkai.0

新虫 (初入文坛)

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Originally posted by 致死之眠 at 2010-08-12 20:03:41:
我检测的是总多糖含量,用的比色法

我说的就是总糖含量啊,你说的比色法就是苯酚硫酸法吗?那么多管怎么实施啊?
11楼2010-08-12 20:41:54
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