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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR产物测序问题
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las_vip086

木虫 (小有名气)
刚看了看，你大概说的是PCR之后的纯化，连接，转化，克隆的步骤，这些都让测序公司给搞的。呵呵。
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11楼2010-08-03 14:53:48
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dcb005

金虫 (著名写手)
las_vip086(金币+1): 2010-08-03 14:58:25
引用回帖:
Originally posted by las_vip086 at 2010-08-03 14:44:44:

汗，我连T载体是什么东东都不知道，自然也无法做了，是T-RFLP吗？这个我们这边没有条件做，要是做RFLP还行，但觉得太麻烦了，呵呵。

promega 或Takara的pGEM-T vector，带有T 尾巴，能连PCR 片段，多用于测序
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★穷则独善其身,达则兼济天下★
12楼2010-08-03 14:54:06
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las_vip086

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by dcb005 at 2010-08-03 14:54:06:

promega 或Takara的pGEM-T vector，带有T 尾巴，能连PCR 片段，多用于测序

明白了，这个测序公司免费搞定，反正测序600个反应，有的讲
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13楼2010-08-03 15:00:05
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shuangzi8761

银虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
我做27F/1492R 用52度 35循环有1500左右带 测序经常有碱基错配情况 55和58没尝试过 我直接送的PCR产物测的
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14楼2011-11-17 15:11:01
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821678162

新虫 (小有名气)
没影响，都可以。
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15楼2011-11-17 19:20:40
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空谷幽风

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
建议你用58度的产物测序，退火温度高点产物的特异性会好很多
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a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
16楼2011-11-17 19:35:29
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