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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR产物测序问题
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las_vip086

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】PCR产物测序问题 已有5人参与

引物用的27F/1492R退火温度分别采用55和58度，电泳跑出来条带都很好，亮度也差不多，不知道拿55还是58度的PCR产物好呢，谢谢！
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1楼 2010-08-03 12:59:19
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dcb005

金虫 (著名写手)
las_vip086(金币+1): 2010-08-03 14:58:25
引用回帖:
Originally posted by las_vip086 at 2010-08-03 14:44:44:

汗，我连T载体是什么东东都不知道，自然也无法做了，是T-RFLP吗？这个我们这边没有条件做，要是做RFLP还行，但觉得太麻烦了，呵呵。

promega 或Takara的pGEM-T vector，带有T 尾巴，能连PCR 片段，多用于测序
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★穷则独善其身,达则兼济天下★
12楼2010-08-03 14:54:06
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shuiyue2728

新虫 (正式写手)
las_vip086(金币+1): 2010-08-03 13:28:03
建议割胶回收，连到T载体上，电专涂板，摇菌提质粒，质粒测序
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2楼2010-08-03 13:09:17
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las_vip086

木虫 (小有名气)
我是想做克隆文库，样品DNA为环境复杂样品，个人打算直接把PCR产物交给测序公司让他们纯化后铺板挑选100个克隆进行测序。
后续我不想自己再麻烦了，像我这样是送55度产物还是58度PCR产物好呢？谢谢！
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3楼2010-08-03 13:31:17
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njauzx

金虫 (小有名气)
弱弱问一下，那两个引物是什么原理？
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4楼2010-08-03 13:38:23
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