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ashel

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助】新柱子没用几天就莫名其妙出现双峰怎么办?已有12人参与

我用的反相C18的长柱子,因为之前的可能用的时间长了,经常拖尾,清洗、再生过也不行,所以买了新柱子,结果新柱子在开始用的两天是好好的,所有的峰都很好,但是用到第三天第四天的时候就会很快出现拖尾,然后就变成双峰,一开始以为柱子的问题,和商家联系,换了两次,这次用第三个新的柱子了,还是这样,到第三天就突然双峰了,因为我同时检测四个物质,到后来四个物质都出现了双峰,现在真是郁闷死了,我的流动相是 乙腈:20mM的乙酸铵溶液=30:70,样品用的流动相溶解的,乙酸铵现在也都是现配现用的,进样量20ul,后来试过 10ul,同样双峰,为什么会这样呢?

下面是两个图,第一张是一开始好的时候的图,第二张就是出现双峰的图(样品浓度不一样)






[ Last edited by ashel on 2010-7-30 at 23:19 ]
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ashel

木虫 (小有名气)

谢谢楼上的了,我这个应该不是水柱子,因为之前他送来的时候说过这个柱子水相比例不能大于90%的,买柱子的时候我也已经把我分析的四个药物给了卖家,这个就是他们后来推荐换给我的,不过我其中两种药物是用氯仿溶解的,血样的处理也主要是用的氯仿,但是我在处理的过程已经用氮气吹干了,最后还是用流动相溶解的,这样还会伤柱子吗?


另外,有同学说 使用缓冲盐的色谱柱如不及时冲洗,就易长菌,柱效降得极快
夏天天气太热,缓冲盐的流动相极易长菌,一般用不到3天,所以我估计我的会不会是里面长菌了自己都没注意到,要是长菌了被吸进系统里面了该怎么处理呢?

[ Last edited by ashel on 2010-8-1 at 10:09 ]
12楼2010-08-01 09:42:18
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jack2070

木虫 (著名写手)

做完前一针,充分平衡,会边好吗?“
平生之志,唯求温饱!
2楼2010-07-31 01:01:54
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luomuwuhen

金虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
chiraler(金币+1):感谢回复!欢迎常来! 2010-08-01 05:42:02
这个问题我也遇到,个人认为新柱子出现这种情况主要是因为开始用的时候用的流动相中水相比例太大,把柱头填料冲塌导致。告诉你个还算有效的再生方法,用乙腈冲完柱子之后,用异丙醇0.3ml的流速冲柱子过夜,最好选择反冲效果好一些,如果还是不行,就再反冲一夜。我之前用的柱子也是你说的情况,让我给弄好了,之后又用了半年多了,现在还用着
药物合成
3楼2010-07-31 08:58:09
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xkp123

木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
pplover(金币+1):感谢参与!填料不就是构成固定相的么。 2010-08-18 21:09:23
引用回帖:
Originally posted by luomuwuhen at 2010-07-31 08:58:09:
这个问题我也遇到,个人认为新柱子出现这种情况主要是因为开始用的时候用的流动相中水相比例太大,把柱头填料冲塌导致。告诉你个还算有效的再生方法,用乙腈冲完柱子之后,用异丙醇0.3ml的流速冲柱子过夜,最好选 ...

不是填料塌陷,而是固定相发生塌陷
4楼2010-07-31 09:05:04
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