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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】SDS-PAGE，丙烯酰胺无法聚合！？
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zylksr

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】SDS-PAGE，丙烯酰胺无法聚合！？ 已有22人参与

今天做了电泳，灌上分离胶30min后，依然是液体，没有丝毫聚合的意思。请问我问题出在何处了？
丙烯酰胺单体储液（30%）
14.55g丙烯酰胺+0.45g 甲叉

分离胶（10%）配方(10mL凝胶中各成分所需体积)
去离子水                               4.0mL
30%丙烯酰胺一甲叉丙烯酰胺              3.3mL
分离胶缓冲液                           2.5mL
10%SDS                                100微升
10%过硫酸铵(新鲜配制)                  100 微升
TEMED                                 4微升
请赐教～

[ Last edited by zylksr on 2010-7-28 at 12:26 ]
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生活如此美好，引无数英雄竞折腰~
1楼 2010-07-28 12:25:07
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王庭

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by sqhnsd at 2010-08-04 12:16:56:
很可能是APS有问题，重新配置。温度高只会凝的快，以现在的气温，肯定不是温度的问题

你检查下是不是配胶的时候两个Tris-base加错了，两者的PH不同，如果加成一样的话，就可能导致两块胶的混凝。
赞一下(1人) 回复此楼
努力做最好的自己！！
22楼2010-08-05 15:55:11
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查看全部 28 个回答

275858014

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看天(金币+5):鼓励鼓励 2010-07-28 15:20:05
温度会影响胶的凝固的，一般我们都放30度下凝固哈！
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2010-07-28 14:41:02
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muchongllt

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看天(金币+1):鼓励回答 2010-07-28 15:20:16
过硫酸铵要新鲜配制的！然后TEMED多加点。应该就可以啦
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2010-07-28 15:04:24
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cqyniu

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-07-28 17:12:57
温度也有关系，但是主要应该是你的丙烯酰胺和聚丙烯酰胺的质量不行，换换试试吧。
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2010-07-28 15:27:59
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