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zylksr

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】SDS-PAGE,丙烯酰胺无法聚合!? 已有22人参与

今天做了电泳,灌上分离胶30min后,依然是液体,没有丝毫聚合的意思。请问我问题出在何处了?
丙烯酰胺单体储液(30%)
14.55g丙烯酰胺+0.45g 甲叉

分离胶(10%)配方(10mL凝胶中各成分所需体积)
去离子水                               4.0mL
30%丙烯酰胺一甲叉丙烯酰胺              3.3mL
分离胶缓冲液                           2.5mL
10%SDS                                100微升
10%过硫酸铵(新鲜配制)                  100 微升
TEMED                                 4微升
请赐教~

[ Last edited by zylksr on 2010-7-28 at 12:26 ]
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生活如此美好,引无数英雄竞折腰~
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zylksr

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by bunny0512 at 2010-07-28 19:55:51:
ThrisPH值多少?我们上层用6.8  下层8.8

跟你们一样的。可能ph有点误差,但也不至于一点也不聚合吧
生活如此美好,引无数英雄竞折腰~
9楼2010-07-28 22:25:35
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zylksr

新虫 (初入文坛)

非常感谢各位的热心!问题解决了!是AP和TEMED的问题。
我把两者比例搞的太高了,而且是AP 的浓度过大。A:T的比应该大概在3:1。 我先前做的过了一夜也聚合了。
不是其他问题。
生活如此美好,引无数英雄竞折腰~
14楼2010-07-29 14:45:11
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