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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】急知原因，急
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luohuan_llt

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助】急知原因，急 已有13人参与

我做HPLC，需要流动相是：CH3OH-K2HPO4水溶液=90:10
pH值要调到5-6之间。未调节前pH是10.41，我用H3PO4调节，但在滴加过程中慢慢变浑浊，出现絮状白色沉淀，是什么原因，我该如何去调节pH值？
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1楼 2010-07-27 16:30:55
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vickyxin

金虫 (小有名气)
luohuan_llt(金币+1): 2010-08-05 09:12:44
1、先配置KH2PO4的缓冲溶液，浓度不能太高，10mmol/l就差不多了
2、有机相的比例不要太高，容易有盐析出。如果你是两相单独走的话，KH2PO4浓度高的话，高有机相比例时，盐析出会堵塞泵。这时要再换水相多冲一会。
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17楼2010-08-03 12:18:20
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jiusjiu

木虫 (正式写手)
luohuan_llt(金币+4): 2010-07-28 09:53:09
有机相浓度太高啦，非要这么强洗脱条件的话
为什么不尝试用60%-80%乙腈试一试？
另外也有可能是你的盐浓度，一般在50mM以下

[ Last edited by jiusjiu on 2010-7-27 at 16:40 ]
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2楼2010-07-27 16:38:17
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qiujm

木虫 (小有名气)
luohuan_llt(金币+2): 2010-07-28 09:53:17
应该是先配缓冲液，在按比例加甲醇，另外缓冲盐浓度不要太高

[ Last edited by qiujm on 2010-7-27 at 16:41 ]
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3楼2010-07-27 16:39:41
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luohuan_llt

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by luohuan_llt at 2010-07-27 16:30:55:
我做HPLC，需要流动相是：CH3OH-K2HPO4水溶液=90:10
pH值要调到5-6之间。未调节前pH是10.41，我用H3PO4调节，但在滴加过程中慢慢变浑浊，出现絮状白色沉淀，是什么原因，我该如何去调节pH值？

我用了80%乙腈-20%的0.02molK2HPO4，我搅拌混匀时就开始浑浊了，但随着我滴加H3PO4，溶液开始变澄清，此时pH值在4.6左右，但随后30min后又有少量的絮状沉淀析出。
K2PO4在pH8左右就开始析出了，难道C18柱就不能用K2PO4做缓冲盐溶液了吗？
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衣带渐宽终不悔 为伊消得人憔悴
4楼2010-07-28 15:25:35
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