24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 4901  |  回复: 41
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

maggie3277

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】蛋白诱导表达不出目标条带 已有22人参与

请教各位虫友,最近做重组蛋白的表达。但在大肠杆菌内重组的pet28a总表达不出我的目标条带,IPTG诱导浓度也设置了梯度,温度也设定了梯度。但就是没有我的目标条带的生成。请问有虫友遇到过类似情况,构建好的质粒却表达不出条带的情况吗?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kfsh

银虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
我也遇到过这种情况,一直不喜欢pET-28的质粒,我连了好多次才连上,而且测序也没问题,但是没有表达,可能是蛋白本身的问题,在宿主内不能表达
41楼2011-12-20 16:56:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 42 个回答

小白3521

金虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+1):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-07-23 23:53:32
测序正确吗?或者换一种表达菌株试一试看
2楼2010-07-23 23:28:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lwiaanngg

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-07-24 06:18:43
LS说的对,你测序结果好么?
我一直不太喜欢28,更喜欢30点,呵呵
3楼2010-07-24 00:11:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunyongle1

木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+3):感谢分享经验~~ 2010-07-24 12:45:46
我也遇到过一次,而且片段不是很长的那种。原来我用全长序列倒是表达出来了,只是量很低。后来就用了部分片段,没想到,就没有了。也不知道什么原因。
建议:首先保证测序正确(其实只要不发生移码突变之类,也应该表达出来啊);你的序列是不是有稀有密码子;你的序列疏水区,信号肽,跨膜域这些都会影响表达;蛋白很大的话,也会影响它的表达。
不知道楼主是用来干什么呢?制备抗原,分析酶活?
4楼2010-07-24 08:04:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 267求调剂 +3 一个叶子zsw 2026-04-05 4/200 2026-04-11 11:23 by zhq0425
[考研] 求助调剂,跨调 +6 X十甫寸Y 2026-04-11 6/300 2026-04-11 10:43 by qingpingzhu
[考研] 求调剂 +9 璃茉一定上岸 2026-04-10 9/450 2026-04-11 10:31 by Delta2012
[考研] 还有化工二轮调剂的学校吗 5+14 化工人999 2026-04-09 48/2400 2026-04-11 10:27 by 89436494
[考研] 293求调剂 +5 勇远库爱314 2026-04-06 5/250 2026-04-11 09:44 by zhq0425
[考研] 复试调剂 +9 积极向上; 2026-04-10 11/550 2026-04-11 09:25 by 猪会飞
[考研] 人工智能320调剂08工类还有机会吗 +11 振—TZ 2026-04-10 11/550 2026-04-10 21:51 by blankyung
[考研] 一志愿矿大,材料工程专硕314分,0856可调都可以 +15 无懈可击的巨人 2026-04-09 15/750 2026-04-10 18:10 by hmn_wj
[考研] 308求调剂 +17 墨墨漠 2026-04-06 17/850 2026-04-09 09:25 by 壹往無前
[考研] 一志愿0807 数一英一 313 有没有二轮调剂 +11 emokidd 2026-04-08 12/600 2026-04-09 09:24 by wyf236
[考研] 求调剂 +13 柒luck 2026-04-07 13/650 2026-04-08 22:46 by 猪会飞
[考研] 材料考研求调剂总分280 +30 mkjlz1 2026-04-06 35/1750 2026-04-08 21:25 by cyh—315
[考研] 材料科学与工程320求调剂,080500 +12 黄瓜味薯片 2026-04-06 12/600 2026-04-08 16:26 by luoyongfeng
[考研] 287求调剂 +6 Fnhc 2026-04-07 6/300 2026-04-08 10:05 by xingguangj
[考研] 277求调剂 数一104分 +9 瓶子PZ 2026-04-05 14/700 2026-04-07 17:52 by 蓝云思雨
[考研] 316求调剂 +7 yyx想调剂 2026-04-05 7/350 2026-04-07 14:31 by shdgaomin
[考研] 304求调剂 +4 luoye0105 2026-04-05 4/200 2026-04-06 21:05 by 木子君1218
[考研] 322求调剂 +3 嗯哼哼恒 2026-04-05 3/150 2026-04-05 19:52 by nepu_uu
[考研] 277求调剂 +5 考研调剂lxh 2026-04-05 5/250 2026-04-05 19:03 by chy09050039
[考研] 295求调剂 +4 A你好研究生 2026-04-04 5/250 2026-04-04 22:46 by yu221
信息提示
请填处理意见