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maggie3277木虫 (小有名气)
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[交流]
【求助/交流】蛋白诱导表达不出目标条带 已有22人参与
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| 请教各位虫友，最近做重组蛋白的表达。但在大肠杆菌内重组的pet28a总表达不出我的目标条带，IPTG诱导浓度也设置了梯度，温度也设定了梯度。但就是没有我的目标条带的生成。请问有虫友遇到过类似情况，构建好的质粒却表达不出条带的情况吗？ |
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chemifunan
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scelab(金币+5):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-07-27 23:37:40
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楼主啊 你还没测完序BLAST就先把载体构建啦 别着急么 测完序BLAST功能了再说 你确定你克隆到的已经是一个基因没有其他序列了？ 16楼的同学 刚看到 是2k吧 2千k没这么大的基因 2k不是很大 蛋白八九十kD吧 我想问16楼的同学 小了几kD是怎么看出来的？ 2k基因一般对应八九十kD的蛋白 跑PAGE怎么看出来只小了几kD 目标蛋白只要和诱导的对照对上了 和Marker稍有偏差是没关系的 除非质谱或蛋白测序才能较精确的定分子量 |
25楼2010-07-27 10:59:17
小白3521
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3楼2010-07-24 00:11:56
sunyongle1
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4楼2010-07-24 08:04:55
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