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liunianlhm

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】药物峰与杂质峰分不开 已有6人参与

各位高手,我做生物样品的时候出现一个问题,药物水溶性的,已经把比例调到了甲醇:0.3%HAc=80:20和90:10以及90.5:9.5,仍然分不开药物峰和样品杂质峰。这三种条件下,药物出峰时间分别为3.7和4.6分钟左右。甲醇:水=90:10,也分不开,TR=6min,且峰型还拖尾。文献里有只用盐溶液做流动相的,我不敢这么弄,怕把柱子毁了。。。
     请教各位高手,有没有什么办法把我药物和杂质峰分开呢?我的柱子是Inersil ods-3的,不知道能不能承受再高比例水相的乙酸了~~~~~说明书上也没有写这个~~~~~
    谢谢各位~~~~~
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novus

铁杆木虫 (著名写手)

liunianlhm(金币+1): 2010-07-26 18:31:34
盐酸溶液做流动相也可以的吧,只要你的流动相pH值不超过色谱柱的使用范围即可。

有想法就大胆去做,实验是做出来的,不是想出来。

(ps:楼主是不是把有机相和水相的比例写反了?)
别太放肆,没什么用!
2楼2010-07-26 10:38:55
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rryfb

新虫 (初入文坛)

liunianlhm(金币+1): 2010-07-26 18:31:45
只用盐做流动相没啥不可以的,用完及时冲就行了。
3楼2010-07-26 13:51:53
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致死之眠

金虫 (知名作家)

梦幻初音

liunianlhm(金币+1):有什么办法延长这个时间呢?而且延长那么多?我没法再加碱了,这个已经PH中性了,这个柱子不支持碱好像 2010-07-26 18:33:10
药物出峰时间分别为3.7和4.6分钟左右...问题就在这里,把时间延长到10-12分钟就好了,哪有3,4分钟出峰的,你做出来3,4分钟出峰发文章人家都不要
Iamendlishdi,Myenglishisveryhaoveryqiangda
4楼2010-07-26 14:09:17
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致死之眠

金虫 (知名作家)

梦幻初音

换成乙腈水,拖尾是ph值不对
Iamendlishdi,Myenglishisveryhaoveryqiangda
5楼2010-07-26 18:35:23
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liunianlhm

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 致死之眠 at 2010-07-26 18:35:23:
换成乙腈水,拖尾是ph值不对

没试过乙腈-水体系的,只想着能用甲醇就尽量甲醇吧。
拖尾是PH不对,你说的对,呵呵,我换成酸性的流动相了,拖尾情况就好了一些~~~~~
6楼2010-07-26 18:45:07
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liunianlhm

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by liunianlhm at 2010-07-26 18:45:07:


没试过乙腈-水体系的,只想着能用甲醇就尽量甲醇吧。
拖尾是PH不对,你说的对,呵呵,我换成酸性的流动相了,拖尾情况就好了一些~~~~~

那除了换乙腈水体系,还有别的方法吗?
7楼2010-07-26 18:45:42
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lingshike

木虫 (正式写手)

liunianlhm(金币+1): 2010-07-26 19:48:19
这种情况,我建议还是用缓冲盐,流动相的ph不同,样品的保留时间会发生很大的变化!尤其是你的目标药物是水溶性的,目标药物如果是只溶于酸或者只溶于碱,这种情况流动相的改变对目标峰的保留时间变化更大.
8楼2010-07-26 19:11:21
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liunianlhm

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by lingshike at 2010-07-26 19:11:21:
这种情况,我建议还是用缓冲盐,流动相的ph不同,样品的保留时间会发生很大的变化!尤其是你的目标药物是水溶性的,目标药物如果是只溶于酸或者只溶于碱,这种情况流动相的改变对目标峰的保留时间变化更大.

对,我的药物溶于水,但是在酸里面溶解性更好,应该是造成保留时间提前的重要原因吧。你的意思是不加酸,不加有机相,只用盐溶液做流动相?
9楼2010-07-26 19:49:37
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damuzhi818

木虫 (正式写手)

将流动相极性降低,延长时间试试。
寒山问拾得曰:“世人谤我、欺我、辱我、笑我、轻我、贱我、厌我、骗我,如何处治乎” 拾得云:“只是忍他、让他、由他、避他、耐他、敬他、不要理他。且待几年
10楼2010-07-27 22:39:48
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