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liunianlhm

银虫 (小有名气)

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[交流] 【求助】药物峰与杂质峰分不开已有6人参与

各位高手，我做生物样品的时候出现一个问题，药物水溶性的，已经把比例调到了甲醇：0.3%HAc=80：20和90：10以及90.5：9.5，仍然分不开药物峰和样品杂质峰。这三种条件下，药物出峰时间分别为3.7和4.6分钟左右。甲醇：水=90：10，也分不开，TR=6min，且峰型还拖尾。文献里有只用盐溶液做流动相的，我不敢这么弄，怕把柱子毁了。。。
请教各位高手，有没有什么办法把我药物和杂质峰分开呢？我的柱子是Inersil ods-3的，不知道能不能承受再高比例水相的乙酸了~~~~~说明书上也没有写这个~~~~~
谢谢各位~~~~~

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1楼 2010-07-20 20:05:19

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lingshike

木虫 (正式写手)

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liunianlhm(金币+1):谢谢，费心了~~~~ 2010-07-28 13:16:08

引用回帖:

Originally posted by liunianlhm at 2010-07-26 19:49:37:

对，我的药物溶于水，但是在酸里面溶解性更好，应该是造成保留时间提前的重要原因吧。你的意思是不加酸，不加有机相，只用盐溶液做流动相？

不是的，如果你的药物溶于酸，那流动相里面肯定要加酸，因为加了酸，药物才能溶解啊。药物不溶解，析出结晶，怎么能做液相呢？这个是对液相的大忌。这也是我们要过0.45微米的原因之一。
有机相可以加一点，比如5%，10%，这个你要进行调试液相柱很少只用盐溶液做流动相，就算是水柱也是一样。
当然以上纯属个人意见，仅供参考。希望对你有用。
刚刚又看了一下你发的主贴，样品是生物制品，有文献全部用缓冲盐。楼主看看文献用的是什么柱子，我查了一下，你用的柱子是日本的C18柱。一般来说C18柱用大比例的缓冲盐也是可以的，用完之后冲洗干净就行了。但是我还是建议用一点有机相，哪怕2%都好。

[ Last edited by lingshike on 2010-7-28 at 01:12 ]